第四章蛋白质化学精选.ppt

水溶性卟啉 水溶性卟啉，如?,?,?,?- 4(对磺苯基)卟啉(TPPS4)和?,?,?,?- 4 (对羧苯基)卟啉(TCPP)是性能优良的蛋白质荧光探针。利用微量蛋白质对TPPS4的荧光熄灭作用，可以测定纳克级的蛋白质。 酸性条件下，TCPP本身荧光很弱，一定量的白蛋白可使TCPP荧光增强，但球蛋白的增强作用不明显，当有ＳＤＳ存在时，白蛋白和球蛋白对TCPP的荧光增强作用均增加，基于这一现象，可以利用1个测定体系分别测定白蛋白和球蛋白。 2）稀土荧光探针 稀土荧光探针法为蛋白质的研究工作开辟了一条新的途径。铕(III)和铽(III)是最常用的两种稀土荧光探针。 铕(III)和铽(III)荧光光谱的高灵敏性和不同环境对荧光的影响，使得铕(III)和铽(III)成为研究蛋白质的有效探针。 铕(III)或铽(III)荧光寿命的测定能够给出蛋白质分子的构象及构象动力学方面的信息。 Austin等使用Tb(III)为探针研究了钙调蛋白的构象动力学。另外稀土螯合物也可以作为荧光探针进行蛋白质的分析，如铽的螯合物已用于蛋白质的定量测定。 * （2）金属离子沉淀法 一些高价金属离子对沉淀蛋白质很有效。它们可以分为三类： 1.第一类为Mn2+，Fe2+，Co2+，Ni2+，Cu2+，Zn2+和Cd2+能和蛋白质分子表面的羧基，氨基、咪唑基、胍基等侧链结合。 2.第二类为C