专题九现代生物科技专题解释.doc

专题九 现代生物科技专题 核心考点整合 考点整合一:基因工程 1.基因工程的基本操作程序 (1)目的基因的获取 ①从基因文库中获取 基因组文库:包含一种生物所有基因的基因文库。 部分基因文库:包含一种生物的一部分基因,如cDNA文库。 ②利用PCR(多聚酶链式反应)技术扩增目的基因 目的——获取大量的目的基因;原理——双链DNA的复制;条件——需要DNA模板、引物、四种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶和酶促反应所需的离子,同时还要控制温度;过程——变性、复性和延伸。 ③人工合成 如果基因比较小、核苷酸序列已知,可以通过DNA合成仪用化学方法直接合成。 (2)基因表达载体的构建(基因工程的核心) 一个基因表达载体的组成:目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 (3)将目的基因导入受体细胞 ①导入植物细胞:农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法等;②导入动物细胞:显微注射技术,即采用显微注射仪将目的基因注入受精卵;③导入微生物细胞:转化法。早期用原核生物作为受体细胞,以大肠杆菌应用最广。一般是将细菌用氯化钙处理制成感受态细胞,再与重组表达载体DNA分子混合,在一定温度下完成转化过程。 (4)目的基因的检测与鉴定 步骤 检测内容 方法 分 子 检 测 第一步 转基因生物染色体的DNA是否插入了目的基因 DNA分子杂交技术(DNADNA之间) 目的基因是否转

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