(五)动物细胞中基因导入和表达 1、转基因动物的历史 2、反转录病毒法构建 3、显微注射法构建 4、优点 5、缺点 1、转基因动物的历史 转基因动物(transgenic animal):通过基因工程技术将外源DNA导入动物生殖细胞,干细胞,早期胚胎,并在染色体上整合,稳定传给子代的技术,转基因技术诱导基因组改变的动物称转基因动物。 1982,Palmiter将大鼠的生长激素基因用微注射方法导入小鼠的受精卵中获得巨型小鼠(supermouse),从而在理论上和实践意义上都将转基因技术提高一步,引起生物学界极大的关注,为基因工程育种提供诱人的前景。 外源目的基因的制备 外源目的基因有效导入生殖细胞或胚胎干细胞 选择获得携有目的基因的细胞 选择合适的体外培养系统和宿主动物 转基因细胞胚胎发育及鉴定 筛选所得的转基因动物品系 2、 反转录病毒法构建 利用反转录病毒可以转移小片段DNA(≤10kb) 3、 显微注射法构建 在光学显微镜下,利用显微操作仪,直接把DNA注射到动物早期胚胎、胚胎干细胞、体细胞或卵母细胞中,然后生产动物个体的技术。 5、优点 (1)基因的表达产物可以迅速通过细胞分泌到培养液之中, (2)培养液成人完全能够进行人工控制, (3)基因产物在动物细胞内已经进行了糖基化,更加接近于天然产物。 6、缺点 (1)动物细胞生长慢。 (2
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