第八节 酶的作用机制和酶的调节 一、酶的活性部位 (active site) 酶的活性部位 酶分子中促使底物发生化学变化的部位称为催化部位。 结合部位(Binding site):酶分子中与底物结合的部位 或区域一般称为结合部位。 结合部位决定酶的专一性。 催化部位决定酶所催化反应的性质。 (一)酶的活性部位的特点 (1)活性部位在酶分子的总体中只占相当小的部分,通常只占整个酶分子体积的1%-2%。 (2)酶的活性部位是一个三维实体。酶的活性取决于活性中心的构象。 (3)酶的活性部位并不是和底物的形状正好互补,而是在酶和底物结合的过程中,底物分子或酶分子,有时是两者的构象同时发生了一定的变化后才互补的,这是催化基团的位置也正好在所催化底物键断裂和即将生成键的适当位置。 (4)酶的活性部位是位于酶分子表面的一个裂缝内。 (5)底物通过次级键较弱的力结合到酶上。 (6)酶活性部位具有柔性或可运动性。 (二)研究酶活性部位的方法 1)修饰剂浓度与酶失活或降低的程度是否成正比,如果成正比,则修饰位于活性中心内。 2)底物或可逆抑制剂与酶结合后能否再被修饰剂共价修饰,如果能被修饰,则修饰部位不在活性中心内。 须用氨基酸测序进行鉴定。 定点诱变法(site-directed mutagenesis) 二、酶催化反应的独特性质 (1)酶反应可分成两类,一类反应仅仅涉及到电子的转移,这类反应的速
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