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高考生物实验总复习 微生物实验基础知识微生物所需要的营养物质 营养成分 主 要 种 类 作 用 碳源 CO2、NaHCO3糖类、脂肪酸等 ①构成微生物的细胞物质和一些代谢产物②异养微生物的主要能源物质 氮源 N2、NH3、铵盐、硝酸盐尿素、牛肉膏和蛋白胨 构成微生物的细胞物质和一些代谢产物 生长因子 维生素、氨基酸、嘌呤碱和嘧啶碱等 补充微生物生物必需的微量有机物 其他 水无机盐 　 培养基的种类及用途 划分依据 种 类 用 途 物理性质 固体培养基 微生物的分类和鉴定 半固体培养基 观察微生物的运动、保存菌种 液体培养基 工业生产 化学成分 天然培养基 工业生产 合成培养基 微生物的分类和鉴定 用途 选择培养基 分离菌种 鉴别培养基 鉴别不同种类的微生物（如饮用水中大肠杆菌的鉴定） 实验室条件下的无菌技术 方 法 应 用 范 围 灭菌 高压蒸气灭菌 培养基、培养皿、移液管等 高温灼烧 接种环、玻璃刮刀等接种器具 紫外或熏蒸灭菌 接种室、接种箱、超净工作台 　 过滤法 　 消毒 酒精、次氯酸钠等化学试剂 实验材料（如外植体）、工作台和器具、培养空间 高温煮沸 某些实验的器具 获得微生物纯种的方法之一—平板划线法1）用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线，则在划线的过程中菌液逐渐减少，菌体　 　　 数量也逐渐减少，菌间的距离增大。在培养10-20小时后，划线末处可观察到由一个菌产生的单菌落；如果再挑取它们后，接种至含有固体培养基的试管斜面上，在斜面上划线，则每个斜面的菌群就是由一个菌产生的后代（或纯种）。2）利用选择培养基进行分离3）液体稀释涂布法微生物相关实验大肠杆菌的培养和分离【实验原理】【材料用具】略【实验步骤】注意：使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃。【思考题】⑴ 本实验所涉及的器材及操作需要无菌。培养基的灭菌方法是___________________,接种环的灭菌方法是_____________，接种操作要在超净工作台酒精灯火焰旁边进行。⑵ 倒平板操作时，待固体培养基冷却至____________℃时，在酒精灯火焰旁，将融化的固体培养基倒在____________里，立即置于_________位置上，轻轻晃动，使培养基铺满平皿底部。⑶ 在固体培养基的平板上连续划线时，接种环蘸取菌液__________次。划线后将培养皿_____________放于_____________℃的_____________中培养。⑷ 液体培养基常用于菌种的活化和扩大培养，和大肠杆菌固体培养基相比，配制液体培养基时，不需要加入_________。在无菌条件下，用接种环把大肠杆菌接种于液体培养基中，置于__________上，在__________℃条件下________培养，一定时间后可观察到菌液由__________变___________。【解析】⑴ 高压蒸汽灭菌 火焰灼烧灭菌 ⑵ 60 培养皿 水平 ⑶ 一 倒置 37 恒温培养箱 ⑷ 琼脂 摇床 37 振荡 澄清 浑浊【练习题】1. 本实验中配置培养基加入的琼脂是为了A．提供碳源　　　　　　　　 B．提供氮源C．使培养基成凝胶状 D．给细菌提供生长因子2．固体培养基配置完成并经过高温消毒后，要趁热倒平板，原因是A．趁热倒平板可以对培养皿进行消毒和灭菌B．培养基冷却后会凝固，不能再均匀倒平板C．保证培养基中的营养成分不会流失D．为微生物的培养提供适宜的温度条件3．下列关于大肠杆菌的表述，不正确的是A．细胞中有复杂的膜结构的细胞器B．在有氧条件下进行有氧呼吸，无氧条件下进行无氧呼吸C．除了拟核外，在细胞质中还有许多小的环状DNA分子D．常作为基因工程目的基因的受体菌4．若要较好地观察到单个细菌增殖后代的菌落，在本实验操作中最好的接种方法是A．用接种环在培养基表面轻点若干点迹B．用接种环在培养基表面轻划一条或几条S线C．将接种环插入培养基浅层后轻轻移出D．将接种环在培养基表面反复涂抹数次5． ⑴ 在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。⑵ 在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。⑶ 若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严