苏教版高中生物选修一3.2《制备和应用固定化酶》教学课件（共30张）.ppt

(2)刚形成的凝胶珠要在CaCl2溶液中浸泡30 min左右，目的是____________________________________________。 (3)如果制作的凝胶珠颜色过浅呈白色，则说明海藻酸钠质量分数为________(过低/过高)。 解析　从对温度变化适应性和应用范围的角度分析，图1反映了固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强且应用范围较广。图2曲线表明质量分数为3%的海藻酸钠包埋效果最好，当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低的原因是海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密，酶分子容易漏出，酶的数量不足。 答案　Ⅰ(1)强　(2)3%　酶的数量不足　Ⅱ(1)③海藻酸钠溶解应适当加热至完全溶化　④海藻酸钠溶液冷却至常温再加入酵母细胞　(2)让凝胶珠形成稳定的结构 (3)过低 结束放映 模板来自于 / * 第三章 酶的应用技术实践 第二节 制备和应用固定化酶 在制造葡萄酒的过程中，菌种产生的酶非常敏感易失活，使得菌种难以重复利用。 溶液酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件容易失活中的酶很难回收，提高了生产成本，还可能影响产品质量。 那么我们能否采取一些方法避免这些情况的发生呢？今天我们就来学习酶的固定化技术解决这些实际问题。 1.知道从酶到固定化酶技术，再到固定化细胞技术的发展过程以及生产中遇到的问题。 2.知道常用的固定化技术及使用范围，明确固定化技术的应用原理，理解固定化细胞的具体步骤，会解释各种现象。（重、难点） 固定化酶技术 1.概念：将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。 （1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离； （2）固定在载体上的酶可以被反复利用； （3）酶反应过程可严格控制。 2.固定化酶技术的优点 3.酶的固定化方法 酶的固定化方法主要可分为四类：吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。吸附法和共价偶联法又可统称为载体结合法。 1．对固定酶的作用影响最小的固定方法是哪一种？ 【提示】　吸附法。 固定化细胞技术 凝胶包埋法 微生物 动物 植物 琼脂 海藻酸钠凝胶 分离 纯化 活力 单一 一系列 原始状态 更高 细胞外酶 载体 好氧性 2．固定化细胞为什么只能用于生产胞外酶和其他能分泌到细胞外的产物？ 【提示】　因为固定化细胞固定的是活细胞，细胞膜具有选择透过性，细胞内有用的物质(如胞内酶)是不能自由进出细胞的。 1．酶在催化时会发生变化，不可反复利用。(×) 【提示】　在催化反应前后性质不变，可反复利用。 2．固定化酶技术所用的固定载体一般为液相的。(×) 【提示】　固定载体一般为固相的。 3．固定化植物细胞可以生产各种色素、香精、药物、酶等。(√) 4．活化酵母菌细胞的方法是高温加热后冷却至45 ℃。(×) 【提示】　加入蒸馏水用玻璃棒搅拌，活化1 h。 固定化酶技术 ①酶的固定方法有哪些？优点分别是什么？ ②固定化酶只能催化一种或一类生化反应吗？ 吸附法 包埋法 共价交联法 共价偶联法 1.酶的固定化方法主要可分为四类 2．常用的制备固定化酶的方法 固定化酶方法 原理 固定载体 优点 吸附法 离子键作用、物理吸附 纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体 工艺简便且条件温和，在生产上应用广泛，而且稳定性能好 交联法 酶和多功能试剂之间形成共价键 利用多功能试剂进行酶与载体之间的交联，从而得到三维的交联网架结构 包埋法 将酶包埋能固化的载体中 酶包裹在聚丙烯酰胺凝胶等高分子凝胶中，或包裹在硝酸纤维素等半透性高分子膜中，前者包埋成格子型，后者包埋成微胶囊型 酵母菌细胞的固定化技术 ①为什么要等海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞？ ②制备过程为什么需要无菌操作？凝胶珠检测有哪些指标？ (1)选用的干酵母要具有较强的活性，而且物种单一。 (2)酵母菌细胞活化时体积会变大，因此活化前应选择体积足够大的容器，防止酵母菌细胞的活化液溢出。 (3)将溶化后的海藻酸钠先冷却至室温，再与酵母菌细胞混合，避免高温杀死酵母菌。 (4)固定化酵母菌细胞时，应将海藻酸钠与酵母菌细胞的混合液用注射器缓慢滴加到饱和硼酸-氯化钙溶液中，而不是注射，以免影响凝胶珠的形成。 注意事项 1.目前，酶已经大规模地应用于各个领域，下列选项属于应用中面临的实际问题的是(　　)。 A．酶通常对强酸、强碱、高温非常敏感，但对有机溶剂不敏感 B．酶的结构比较稳定，所以催化功能很高 C．酶用于生产时可能会混在产物中，影响产品的质量 D．直接用于生产中的酶可以多次利用 解析　人们对酶的使用经历了直接使用酶→酶制剂→固定化酶→固定化细胞四个阶段。固定化酶的使用使酶与反应液易于分离，又可以反复利用，降低了生产成本，提高了产品质量；固定