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选修一基础知识背读材料 一 微生物的培养 一、培养基1．概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其 的营养基质培养基。分为培养基和培养基。培养基．营养构成：各种培养基一般都含有水、 和，此外还要满足微生物生长对以及的要求。2）配制合格与否的检测方法：将制备好的培养基放在恒温箱中保温1-2天后看有无菌落形成，如果没有菌落形成说明制作合格，反之则不合格。 5.倒平板操作的讨论 1培养基灭菌后，需要冷却到50左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 3平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 答：既可以防止皿盖上的水珠落入培养基可以培养基水分 4）在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 平板划线操作的讨论 1为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 2在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。涂布平板操作的讨论 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 提示：应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围；等等。二、无菌技术(一)获得纯净培养物的关键是防止外来人侵，具体操作如下： 1．对实验操作的 、操作者的进行清洁和消毒。 2．将用于微生物培养的 、接种用具和培养基等进行。 3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。 ()消毒和灭菌 消毒是指使用较为的物理或化学方法仅杀死物体表面或对人体有害的微生物()；灭菌是指使用 的理化因素杀死物体内外 的微生物。挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵 　　　　　　　　　　　　　↓　　　　↓ 　　　　　　　　　　　　 果酒　　　果醋所用豆腐的含水量为70％左右，水分过多则腐乳不易成形。 酒精含量越高，使腐乳成熟延长；酒精含量过低，豆腐易腐败。制作泡菜所用微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型。含抗生素牛奶不能生产酸奶的原因是抗生素杀死乳酸菌国家规定肉制品中不超过30mg/kg，酱腌菜中不超过20mg/kg，婴儿奶粉中不超过2mg/kg。亚硝酸盐被吸收后随尿液排出体外，但在适宜pH 、温度和一定微生物作用下形成致癌物质亚硝胺。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。～选择菌落数在30～300的平板进行计数。土壤取样如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？ 统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值 2.愈伤组织是通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞 3.材料选择：植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。菊花组织培养一般选择未开化植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。选取生长旺盛嫩枝进行组培的原因是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。 4.营养成分：常用的培养基是MS培养基，其中含有的大量元素（N、P、S、K、Ca、Mg）、微量元素（Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co）、有机物（甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖）等。 5.植物激素：在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素，其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。（高根低芽） 6.在配制MS培养基时，由于菊花茎段组织培养比较容易，可以不添加植物激素 7.环境条件：PH、温度、光照等环境条件。菊花组培所需PH为5.8，温度为18-22℃，光照条件为每日