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实验药物 实验药物 统计学方法 本实验全部数据均采用SPSS18.0软件包进行统计学处理。 计量资料以均数±标准差（x±s）表示，满足正态分布、方差齐性的指标，采用单因素方差分析（AVOVA）。 多组与一组比较采用Dunnett法，每两组比较用LSD法；对于方差不齐的数据用Tamhane’sT2法。 （检验水准α=0.05，P＞0.05表示无统计学意义；P＜0.05说明有统计学意义；P＜0.01表示有显著统计学意义）。 实验结果---一般情况 实验结果 实验结果 实验结果 实验结果---卵巢形态学 空白组:卵巢组织结构清晰，可见各级卵泡形态结构正常。间质未见炎细胞浸润及纤维化。 实验结果---卵巢形态学 模型组:可见卵巢组织体积缩小，部分被纤维组织取代；卵巢内极少有成熟卵泡，生长的卵泡亦明显减少，卵泡细胞形态欠规则，卵泡边缘不规则地向邻近的间质延伸，且卵泡周边颗粒细胞排列紊乱，数量减少；卵泡闭锁明显增多；黄体数目极少；卵巢间质及卵泡内可见淋巴细胞及浆细胞浸润。 实验结果---卵巢形态学 右归组：卵巢体积增大，与正常组相近；各级卵泡数目增多，卵泡生长较模型组活跃，成熟卵泡增多，与正常组成熟卵泡体积接近，卵泡液含量增多；颗粒细胞层次较模型组多，排列未见紊乱；黄体数量较多。 实验结果---卵巢形态学 西药组:卵巢体积较正常组稍小；各级卵泡可见，有少部分卵泡发育不良；卵泡颗拉细胞层较模型组增多；卵巢间质偶见少量淋巴细胞及浆细胞浸润。 实验结果---卵巢形态学 中西组：卵巢体积、各级卵泡及卵泡生长情况、卵泡液含量、颗粒细胞层次均与正常组接近，颗粒细胞排列尚整齐；黄体数量基本正常。 讨论 讨论 Treg 讨论 Th17 /Treg细胞平衡状态的打破是很多自身免疫性疾病发病的重要因素。 讨论 讨论 讨论 ROR-γt FOXP-3 IL-23 IL-17 对机体产生免疫损伤 IL-2 初始CD4+T细胞 IL-6 TGF-β Th17 Th17细胞水 平明显高于 健康妇女； Treg细胞水 平较正常妇女 有增高趋势； Th17/Treg水 平较正常妇女 明显增高。 有临床研究通过流式细胞仪检测POF妇女外周血Th17细胞和Treg细胞的表达，发现POF患者： Th17细胞的过度激活 Treg细胞数目减少 多种相同或不同细胞因子的正负调节。 自身免疫性POF 降低TH17表达 右归丸 平衡Th17/Treg 升高E2 降低FSH 缓解卵巢损伤，治疗自身免疫性POF * * * * 硕士研究生 论文答辩报告 硕士论文答辩报告 本实验来源于2011年常德市科技局基金课题 课题编号:2011SK18 右归丸对自身免疫性POF模型小鼠卵巢组织Th17/Treg蛋白表达的影响 研 究 生： 陆 惠 导 师： 丁 青 教授 专 业： 中西医结合临床 研究方向： 妇科内分泌 1 2 3 4 5 引言 实验材料与方法 结果与分析 讨论 结论 论文答辩报告 引 言 卵巢早衰是指性器官发育正常的女性在40岁以前出现闭经，伴LH和FSH水平升高，E2水平降低，卵泡数量减少，卵巢体积缩小并最终萎缩的卵巢功能衰退现象。 本病发病率逐年上升，病因复杂，治疗难度大 。西医有激素替代疗法、辅助赠卵法及 近年报道的卵巢组织冻存法等疗法。中医主要从“肾虚”论治。右归丸为补肾中药代表方。 本实验通过观察右归丸对自身免疫性POF模型小鼠卵巢组织TH17/Treg蛋白表达的影响，探讨右归丸对自身免疫性POF的疗效及机制，为临床用药提供实验依据。 山药 山茱萸 枸 杞 鹿角胶 菟丝子 杜 仲 当 归 肉 桂 制附子 熟 地 右归丸中药组成 实验材料与方法 补佳乐 安宫黄体酮 实验材料与方法 SPF级健康BALB/c雌性小鼠体重20±2g 饲养温度20-25oC 湿度50-70% 由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供 （许可证号：SCXK（湘）2009-0004 小鼠透明带多肽3片段（pZP3） 弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂 E2、FSH定量检测试剂盒 一步法RT-PCR试剂盒 Th17与Treg引物合成 台式高速离心机 全自动酶标检测仪 ThermoPxZ型 PCR仪 电泳仪 紫外分光光度仪 DNA热循环扩增仪 凝胶扫描成像分析系统 动 物 试 剂 仪 器 实验材料与方法 实验设备 实验材料与方法 SPF级健康BALB/c雌性小鼠由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供。饲养温度20-25℃，湿度50-70%。 实验材料与方法---造模 取透明带多肽片粉末