第五章 体内药物分析（参考）.pptVIP

* * * * * 光谱分析法在样品预处理时，就需经过复杂的精制处理，如若没有紫外吸收，衍生反应后，（表3-11，）这些衍生剂都有紫外，还要进一步进行精制处理，经过这么多处理步骤后，其结果还可靠吗？ 前面原因是指GC，后面检测器不够灵敏是指没有紫外吸收、不具荧光。（画色谱示意图） * * * * * * * * * * * * * * * * * 超声将中空纤维洗净，再放入溶剂中，超声，使壁上挂满溶剂，再用微量注射器将溶剂推满整个中空纤维，再将纤维放入样品中，萃取完成后进样。 * * * * * * * * * * * * * * * * 在室温高时，血凝过程进行得很快，宜在血凝后半小时内分离血清。当室温低时，血凝过程较慢，可将血液置37℃温度水浴中加速血清析出。 * 如氯噻酮可与红血球结合，其动力学行为与在血浆中不同。在血球中的浓度比在血浆中的难点大50-100倍。因此，用全血样品，可用低灵敏度的仪器测定。 从众，尊重历史，某种药物，大家都用全血，你也得用，以免混乱，如血压单位，几十年来一直都用mm汞柱，突然改了单位，不适应。 （不讲 全血样品是由血浆和血细胞（包括抗凝剂）组成，是非均匀溶液，测定时必须使血细胞破裂（如测定CsA时加入氢氧化钠，超声或冻融）使之成为均匀溶液。） 血样存在的缺点。血样属于损伤性采样方式获得，因此，取样量受到一定限制，而且抽血比较麻烦，尤其是间隔时间比较短的多次抽血（Ⅰ期临床试验要十几个取样点），病人或实验者不愿配合；抽血要由护士专门进行。 血样主要用于药物动力学、生物利用度、临床治疗药物监测等研究与实际工作中，其测定方法，大都测定原型药物总量。 * 血清比血浆只是少一种纤维蛋白原 C血浆= C血清 * * * 尿药浓度变化大，应测定一定时间内排入尿中药物的总量。 * * 测定尿中药物的总量时，将一定时间内（如8h;12h或24h等）排泄的尿液全部储存起来，并记录其体积，取其一部分测定药物浓度，然后乘以尿量求得排泄总量。 如采集24h的尿液时，一般在上午8点让患者排尿并弃去不要，立即服药，之后排出的尿全部储存于干净的容器中，直到次日8点再让患者排尿，并加入到容器中。将此容器中盛(cheng第二音)的尿液作为检液。 P63页 最后一行 ：采集一定时间尿液时，，常用涂蜡的一次性纸杯或用玻璃杯并用量筒准确量好后 挑二毛病—涂蜡杯--吸附 纸杯----体积小 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 生物样品的基质——组成复杂、干扰多血清中含有高分子的蛋白质和低分子的糖、脂肪、尿素等有机物，也含有Na+、K+、Cl- 等无机物,尿液中含有尿素、肌酸、尿囊素、氨、Na+、K+、Cl- 等;药物组分——药物含量低，一般为?g或ng水平，经预处理使纯化、富集 预处理—降低背景噪音—提高灵敏度特异性强、灵敏度高的分析方法 — 预处理简单,不具备分离功能的方法(光谱法)预处理十分重要 固相萃取法 注意： 1.血浆样品可直接上柱 2.样品量0.1-2ml 3. 流速1-2ml/min 固相萃取法 优点 ① 引入杂质少 ② 完全避免乳化的形成 ③ 在优化条件下有较高萃取率、重现性较好 ④ 使用的溶剂大多可与水混溶，易于自动化 缺点 ① 价格昂贵 ② 技术要求高 ③ 批-批之间有差异 SPE与LLE及沉淀蛋白法的比较 SPE：高提取率及高选择性，快速、简 单，可自动化，应用较多。 LLE：两相间分配平衡时间较长萃取回收率 及选择性随药物及萃取条件而变化沉 淀。 蛋白法：快速简便、回收率高；待测物含 量低时不适用 自动化SPE技术 优点 ① 节约时间，400个/hr，确保了较高的工作效率 ② 减少了操作误差，提高准确度和精密度 ③ 安全性好，可避免人对有毒样品的接触 缺点 ① 残留物对测定的影响 ② 在采用连续测定时，要考虑样品理化 性质的稳定性对测定的影响 2.2固相微萃取法（SPME ） SPME装置简单，类似于气相色谱微量注射器，其基本装置如图 1．压杆 2．简体 3．压杆卡持螺钉 4．Z形槽 5．简体视窗 6．调节针头长度的定位器7．拉伸弹簧 8．密封隔膜 9．注射针管 10．熔融石英纤维 11．熔融石英纤维 SPME操作方法 固相微萃取方法分为 萃取过程和解吸过程两步 ①萃取过程—具有吸附涂层的萃取纤维暴露在样品中进行萃取 ②解吸过程—将已完成萃取过程的萃取器针头插入气相色谱进样装置的气化室内，使萃取纤维暴