2009福建-02气相色谱[优化].ppt

气相色谱法及其应用 第二军医大学药学院 闻俊 样品放到小瓶后迅速封口 小瓶被放到顶空进样器上 自动加热获得气液两相平衡 将液上气体注入GC分析 顶空分析就是一种理想的样品净化方法 传统的液液萃取以及?SPE?都是将样品溶在液体中,不可避免地会有一些共萃取物干扰分析 溶剂本身的纯度在痕量分析中尤为重要 气体作溶剂可避免不必要的干扰,因为高纯度气体很容易得到,且成本较低 静态顶空气相色谱 将液体或固体样品置于一个恒温密闭的样品容器中，使其中的挥发性成分逸出，在达到气-液或气-固平衡后采集蒸汽相进行气相色谱分析。 动态顶空气相色谱 把液体或固体样品置于样品管中，向样品管中通入惰性气体（N2），将待测组分吹扫出来，并使其通过装有吸附剂的捕集管，被吸附剂吸附，然后将吸附剂加热，使被测组分脱附，在用载气将脱附的样品气体带入气相色谱仪中进行分析。因其操作过程中包括了吹扫和捕集两个主要环节,所以也叫吹扫-捕集（purge-trap）法。 顶空－固相微萃取 SPME SPME的优势 ① 不使用有毒有机溶剂 ② 集采样、萃取、浓缩、进样于一体，避免引入多步误差 ③ 进样空白值小(或可忽略) ④ 简单快速等优点 Detectors Thermal Conductivity Detector (TCD) Flame Ionization Detector (FID)* Electron Capture Detector (ECD)* Flame Photometric Detector (FPD) Fourier Transform Infrared Detector (FTIR) Mass Spectrometer (MS) Flame Ionization Mechanism Qualitative analysis 1 Standard comparison 2 Relative retention value / retention index 3 Functional group classification 4 Hyphenation 5 Fingerprint techniques Quantitative analysis 1 Area normalization method 2 External standard method 3 Internal standard method 4 Internal standard + correction factor method 5 Internal standard + calibration curve method 能进行硅烷化的化合物包括醇、硫醇、酚、羧酸和胺等 其反应性一般为醇酚羧酸胺酰胺 反应性也受立体阻碍的影响 醇的反应性是伯醇仲醇叔醇， 胺是伯胺仲胺。 应用示例：食品中氯霉素残留的测定 氯霉素（Chloram-phenicol，CAP），是一种有效的广谱抗生素，常用于动物各种传染性疾病的治疗，对多种病原菌有较强的抑制作用 在水产养殖业中得到广泛应用，同时也带来了水产品中氯霉素残留的严重问题 氯霉素存在严重的毒副作用 抑制人体骨髓造血功能，引起人类的再生障碍性贫血、粒状白细胞缺乏症、新生儿、早产儿灰色综合症等疾病 低浓度的药物残留会诱发致病菌的耐药性 动物食品中的氯霉素残留对人类的健康构成了巨大威胁 欧盟、美国等均在法规中规定CAP残留限量标准为“零容许量”（Zero tolerance），即不得检出。 欧盟——10 →1 →0.1 μg/kg 美国FDA——5 →1 →0.3 μg/kg 提高检测灵敏度 存在卤素基团，可以采用ECD检测 联用MS可以提高灵敏度 结构中含有羟基、硝基等强极性基团, 不易挥发，必须对其官能团进行酯化、硅烷化或酰化才能进行GC测定 常用为硅烷化 动物组织中氯霉素的测定 样品处理 取组织捣碎机打碎的样品,加入5 mL乙酸乙酯涡旋振荡混匀3min,超声提取15 min, 4500 /min离心3 min,转移乙酸乙酯; 再在样品中加入5 mL乙酸乙酯同法操作，合并乙酸乙酯层,用吹氮浓缩仪在55 ℃下吹干 以上两步将动物组织中的氯霉素提取出来 动物组织中氯霉素的测定 脱脂 加入500μL甲醇溶解残渣,再加入5 mL 1 mol/L氯化钠溶液和2. 5 mL正己烷,于涡旋振荡器上混匀2 min,弃去正己烷层,再加入2 ×2. 5 mL正己烷洗涤,弃去正己烷层;加入5 mL乙酸乙酯,混匀3 min,转移乙酸乙酯,用无水硫酸钠脱水后在吹氮浓缩仪上55 ℃下吹干 本步骤的目的是将样品进行二次净化，采用正己烷除去样品中的脂性成分 动物组织中氯霉素的测定 衍生化 加入100μL甲苯溶解残渣,再加入100μ