碱基修饰剂.ppt

第5章 基因突变、DNA损伤与修复 突 变 概 述 5.1 基因突变的类型 移码突变 基因的编码序列中发生核苷酸增加或缺失的突变，使处在突变发生位置下游的，密码子组成发生改变。从而造成移码突变。 移码突变将合成错误的往往没有生物活性的蛋白质,或是形成终止密码子,使肽链合成提前终止。 5.2 突变的原因 自发突变（spontaneous mutations） 诱发突变（induced mutations） DNA复制错误 自发的化学变化 脱嘌呤（depurination） 脱氨（基）(deamination)作用 氧化作用损伤碱基（oxidativelydamaged bases） 5.2.2 诱发突变 放射线 紫外线、 X-射线、 γ射线、 宇宙射线 化学物质 碱基类似物:5-溴尿嘧啶\氨基嘌呤\迭氮胸苷 碱基的修饰剂:亚硝酸\羟胺\烷化剂 DNA插入剂:原黄素\吖啶橙\溴化乙啶 碱基类似物（ Base analogs） 分子结构极其相似于DNA分子中的正常碱基，故可以结合进复制的DNA链中去。 引起突变的原因是：它们能够以可改变的状态形式存在（即互变异构体）： -------酮式（普通状态） ------ 烯醇式（稀有状态） 两种状态中的每一种状态与DNA的一种不同的碱基配对，结果产生碱基对替换突变（substitution mutation）。 碱基修饰剂（Base-Modifying Agents） 与碱基类似物不同，许多化学物质作为诱变剂，通过直接地修饰碱基的化学结构和化学性质。 主要有三种类型 : 脱氨基剂（Deaminating agent） 羟 化 剂（Hydroxylating agent） 烷 化 剂（Alkylating agent） (1) 脱氨基剂：能使碱基上的氨基脱落下来，从而改变碱基的结构和配对特性。 亚硝酸（introus acid, NA）有氧化脱氨作用，可使G第2个碳原子上的氨脱去，产生黄嘌呤（xanthine,x），黄嘌呤 (H) 仍和C配对，故不产生转换突变; 但C和A脱氨后分别产生U和次黄嘌呤H，产生了转换，使C∶G转换成A∶T，A∶T转换成G∶C （3）烷 化 剂 （Alkylating agent） 烷化剂是带有一个或几个不稳定烷基的化合物，能同碱基起作用，使之带上烷基（～CH3，－CH2CH3），继而引起复制时碱基错配。 比较常见的有：烷化剂如甲基磺酸乙脂（EMS）,氮芥(NM)，甲基黄酸甲脂（MMS），亚硝基胍（NG）等 EMS使G的第7位烷化，使T的第4位上烷化，结果产生的O-7-E-G和 O-4-E-T分别和T、G配对，导致G∶C对转换成A∶T对；T∶A对转换成C∶G DNA插入剂 5.3 修 复 碱基切除修复 一些碱基在自发或诱变下会发生脱酰胺，然后改变配对性质，造成氨基转换突变. A变为I与C配对 C变为U与A配对 核苷酸切除修复 通过特异的核酸内切酶识别损伤部位 由酶的复合物在损伤的两边切除几个核苷酸 DNA 聚合酶以母链为模板复制合成新子链 DNA连接酶将切口补平 5.3.3 错配修复（mismatch repair） 5.3.4 重组修复（recombination repairing） 当DNA分子的损伤面较大，还来不及修复完善就进行复制时，损伤部位因无模板指引，复制出来的新子链会出现缺口，这时，就靠重组蛋白RecA的核酸酶活性将另一股健康的母链与缺口部分进行交换，以填补缺口。 重组修复（recombination-repain） 损伤链移到己完成复制的链上，如果损伤又只发生在双链DNA中的一股单链，则下一轮的复制损伤链就只占DNA的1／4，不断复制后，其比例就越来越低，称为把损伤链“稀释”掉。 5.3.5 SOS修复系统 SOS修复是指DNA受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种DNA修复方式，修复结果只是能维持基因组的完整性，提高细胞的生成率，但留下的错误较多，故又称为错误倾向修复(errorprone repair)，使细胞有较高的突变率。 差错倾向修复（Error prone repair） Jeam Weigle 等发现 UV 感染 细菌(用UV照射过) － 存活率高 λ噬菌体 细菌(UV未照射过) － 存活率低 UV-复活（UV-reactivation），也称W-复活 SOS反应（SOS response） SOS修复 是