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结直肠癌中ret及相关基因蛋白的表达及意义 　　摘要：目的 通过研究结直肠癌中的原癌基因ret、ras以及抑癌基因p53，揭示其在结直肠癌中的意义。方法 采用免疫组织化学Envision法来对60例结直肠癌、20例结直肠腺瘤和20例正常结直肠黏膜患者中ret、ras、p53基因蛋白的表达进行检测。结果 ①ret在结直肠癌中的阳性表达率为30%，高于直肠腺瘤中0%及直肠正常组织中的5%，差异有统计学意义；原癌基因k-ras在肿瘤患者、腺瘤患者以及正常人中均表达，阳性率分别为70%、45%和5%，在肿瘤患者中的阳性率明显高于腺瘤患者和正常人，在正常人中的阳性率很低，差异有统计学意义；p53在肿瘤患者、腺瘤患者以及正常人均有表达，阳性率分别为90%、30%、10%，在肿瘤患者中的阳性率明显高于腺瘤患者和正常人，差异有统计学意义。②RET在结直肠癌中的表达和患者的性别、年龄、浸润深度、生存期无关，与淋巴转移有关；k-ras在结直肠癌中的表达和患者的性别、年龄、生存期无关，与浸润深度和淋巴转移有关；P53在结直肠癌中的表达和患者的性别、年龄、浸润深度和生存期无关，和淋巴转移有关。结论 ①ret原癌基因可能是结直肠癌发生发展的一个因素，在结直肠癌的发生、发展中起一定作用；②K-ras及p53蛋白在结直肠癌的阳性表达率均高于结直肠腺瘤和正常组织中，与淋巴转移和浸润深度有关，是肿瘤发生、发展的分子靶标。 　　关键词：结直肠癌；ret；ras；K-ras；p53；表达；意义 　　结直肠癌（colorectal cancer）是比较常见的消化道恶性肿瘤，随着老龄化的增加[1]，结直肠癌的发病率也在不断的上升。其中早期诊断为提高结直肠癌预后的关键。我们对结直肠癌中的原癌基因ret、ras以及抑癌基因p53进行了研究，现报道如下。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料 选取贵阳医学院附属医院病理科2003年1月～2004年12月手术切除的60例结直肠癌和同期活检的20例腺瘤、20例结直肠正常粘膜存档蜡块进行研究，其中男性43例，女性57例，年龄从29～88岁，平均年龄为（57.3±6.2）岁。 　　1.2方法 　　1.2.1标本处理 用10%的中性福尔马林将标本进行固定并用石蜡进行包埋。切片厚3～4 μm，按照Envision说明书进行免疫组织化学染色。 　　1.2.2 结果判断 Ras和ret蛋白免疫组织化学染色阳性部位为胞浆；p53的阳性部位是细胞核。细胞核或细胞浆呈棕黄色则是阳性细胞。根据Friedrich免疫反应评分标准，染色强度的计分与阳性细胞的百分数计分相乘。阳性细胞的百分数计分为：0分：阳性细胞率75%。染色强度计分为：0分：不着色；1分：浅棕黄色；2分：棕黄色；3分：棕褐色。IRS：阴性（-）：0～2分；弱阳性（+）：3～4分；中阳性（++）：5～7分；强阳性（+++）：8分。 　　1.3统计学处理 用SPSS 17.0软件包对数据进行统计学分析，P0.05表示差异有统计学意义。 　　2结果 　　2.1 Ret、ras、P53在结直肠癌、结直肠腺瘤和结直肠黏膜中的表达，见表1。 　　由表1可得ret、ras和P53在结直肠癌、结直肠腺癌和结直肠黏膜三者中差异均具有统计学意义（P0.05），见图1～5。 　　2.2结直肠癌、结直肠腺瘤和结直肠黏膜中Ret、ras、P53表达的两两比较，见表2。 　　综合表1、2可得：ret、ras和P53在结直肠癌与结直肠腺瘤中的阳性表达差异有统计学意义（P0.05），ret、ras和P53在结直肠癌中的阳性表达比结直肠腺瘤高。 　　ret、ras和P53在结直肠癌与结直肠黏膜中的阳性表达差异有统计学意义（P0.05）。 　　2.3 ret、ras、p53及相关基因蛋白的表达与结直肠癌患者生物学行为的关系，见表3。 　　由表3可见RET在结直肠癌中的表达和患者的性别、年龄、浸润深度、生存期无关，与淋巴转移有关；Ras在结直肠癌中的表达和患者的性别、年龄、生存期无关，与浸润深度和淋巴转移有关；P53在结直肠癌中的表达和患者的性别、年龄、浸润深度和生存期无关和淋巴转移有关。 　　3讨论 　　结直肠癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，对人类危害严重。众多研究者普遍认为，结直肠癌的发生是一个涉及多基因、涉及多个原癌基因的激活与抑癌基因的失活。 　　Ret原癌基因编码一组属于酪氨酸激酶受体超家族的跨膜蛋白，即Ret蛋白，该蛋白对神经内分泌系统、肾脏发育、神经嵴细胞增殖及肠神经系统发育具有重要作用，故其突变与多种疾病的发生密切相关[2-3]。Ret基因突变可增强Ret酪氨酸激酶信号转导的功能，促使激酶的活化和原癌基因的转化，其主要机制是[4]由于氨基酸位点发生突变。①Ret