【2017年整理】分子生物学复习资料 四川理工学院.doc

分子生物学复习提纲 第二章 染色体和复制 1.DNA和染色体： 染色体的组成：真核的细胞染色体由DNA、蛋白质（包括组蛋白和非组蛋白）、RNA组成，各组分的含量比例为1：1：0.6：0.1。其中DNA与组蛋白是染色质的稳定成分。真核的细胞染色体主要由DNA与蛋白质组成，通过DNA与蛋白质形成基本单位——核小体，再由核小体形成染色质； 组蛋白的功能、特点：组蛋白(histone)是染色体的结构蛋白，与DNA组成核小体。组蛋白分为五种H1，H2A，H2B，H3，H4，这些都含有大量的赖氨酸和精氨酸，可以和酸性的DNA紧密结合（非特异性结合）。组蛋白具有如下特性 (1).进化上的极端保守性 (2).无组织特异性 (3).肽链上氨基酸分布的不对称性 (4).组蛋白具有修饰作用 (5).H5组蛋白富含赖氨酸； 非组蛋白的特点：(1)非组蛋白具多样性和异质性 (2)在整个细胞周期都进行合成，组蛋白只在S期与DNA复制同步进行。 (3)能识别特异的DNA序列，识别与结合籍氢键和离子键。 (4)功能：帮助DNA折叠；协助DNA复制；调节基因表达。 真核染色体DNA的重复序列的种类和各自特点： 不重复序列：这种序列大小不等，每一段顺序决定一个蛋白质结构，为一个蛋白质基因，通常为结构基因； 中度重复序列:基础顺序较长，可达100～300bp，重复次数几百至几万，如组蛋白基因，rRNA基因。在物种进化过程中是基因组中可移动的遗传元件，并且影响基因表达； 高度重复序列：重复次数可达几百万次，顺序较短，含5～100bp，GC含量高，这部分DNA又称为卫星DNA，这类DNA只在真核细胞中发现，通常不转录。 核小体的结构要点： ◆每个核小体单位包括200bp左右的DNA超螺旋和一个组蛋白八聚体及一个分子H1组蛋白 ◆2分子组蛋白H2B、H2A、H3和H4构成核小体的盘状核心结构八聚体 ◆146bp的DNA分子超螺旋盘绕组蛋白八聚体1.75圈, 组蛋白H1在核心颗粒外结合额外20bp DNA，锁住核小体DNA的进出端，起稳定核小体的作用。 ◆两个相邻核小体之间以连接DNA 相连，典型长度60bp，不同物种变化值为0～80bp ◆组蛋白与DNA之间的相互作用主要是结构性的，实验表明，核小体具有自组装（self-assemble）的性质 染色体的组装过程： 每圈6个核小体折叠形成螺旋管，再折叠为直径为30nm的中空的螺线管纤维（solenoid），这种结构称为染色质纤丝。染色质纤丝再进一步折叠形成许多超螺线管，并附着在一个由非组蛋白组成的中央骨架（scaffold）上而成为染色单体（chromatid），DNA总共压缩8400倍 原核基因组的特点：1.基因组通常仅由一条环状双链DNA分子组成。原核生物的单一环状染色体是区别于真核生物中的多条线状染色体的最好的标志 2.结构简练：原核生物DNA分子的大部分是用来编码蛋白质的，只有很少一部分不转录 3.存在转录单元：功能相关的基因，往往丛集在基因组的一个或几个特定部位，形成转录单元，可被一起转录为含多个mRNA的分子，叫多顺反子转录 4.有重叠基因：在一些细菌和病毒中有同一段DN能携带两种不同的蛋白质信息，即重叠基因。 5.基因组中只有1个复制起点。 6.基因序列是连续的，无内含子结构。 7.基因组中的重复序列很少。编码蛋白质结构基因多为单拷贝，但编码rRNA的基因往往是多拷贝的， 8.细菌基因组中存在可移动的DNA序列，包括插入序列和转座子。 DNA双螺旋结构的要点： 超螺旋的形成 2.复制：半保留复制的定义：当细胞分裂时， 细胞核染色体中的DNA的双螺旋链解开，然后以解开后的每一条链为模板，按照碱基配对的原则，分别合成与两条模板链互补的新链。新合成的子代DNA双链中有一条链来自于母链，另一条是新合成的，两条子链既彼此全同又和母链相同，子链中只保留一条母链，这种方式称为半保留复制。 复制的方向：DNA复制从起点开始单向或双向进行直到终点为止。 复制的起点和终点的名称： 三种DNA聚合酶的功能：DNA聚合酶能将两个脱氧核苷酸连接起来,是DNA复制的主要酶。polⅠ不是复制的主要聚合酶，具有3‘→5’外切酶活性和5‘→3’外切酶活性。polⅡ不是DNA复制的主要酶，它可能在DNA损伤修复中起一定作用。pol Ⅲ是细胞内DNA复制所必需的酶，pol Ⅲ以脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)为原料,催化DNA核苷酸的连接，合成的方向是5′→3′,以RNA为引物 DNA聚合酶Ⅰ的作用特点： polⅠ不是复制的主要聚合酶，具有3‘→5’外切酶活性和5‘→3’外切酶活性。 3‘→5’外切酶活性是从3‘→5’方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸。 而在DNA损伤的修复和对冈崎片段5‘-末端RNA引物的去除依赖此5‘→3’外切