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【2017年整理】典型生产案例(酒精等)发酵产品
典型发酵产品介绍 传统发酵产品 现代发酵产品 本章要求 熟悉传统及现代发酵产品 四微生物酶制剂生产工艺举例 α-淀粉酶生产工艺 微酸性 固体曲法 霉菌 中性至微碱性 液体深层发酵 细菌 微生物培养条件 微生物培养法 菌种 一般在酶活达到最高峰时结束发酵离心以硅藻土作为助滤剂去除菌体及不溶物 在钙离子存在下低温真空浓缩后加入防腐剂稳定剂以及缓冲剂后就成为成品 为制造高活性的淀粉酶并便于贮运可把发酵液用硫酸铵或有机沉淀剂沉淀制成粉状酶制剂最好贮藏在25℃以下较干燥避光的地方 利用蛋白酶比淀粉酶的耐热性差的特点将α-淀粉酶的发酵液加热处理可以使淀粉酶的储藏稳定性大为提高在培养基中添加柠檬酸盐可抑制某些菌株产生的蛋白酶用底物淀粉进行吸附也可将淀粉酶和蛋白酶进行分离 一米曲霉固态法α-淀粉酶生产工艺 1 生产工艺流程 试管斜面培养基 ↓ 三角瓶种子 ↓ 种曲培养 ↓ 厚层通风培养 ↓ 烘干 ↓ 粗酶制剂 ↓ 酿造等用 粉碎 ↓ 抽提 ↓ 过滤 ↓ 沉淀 ↓ 压滤 ↓ 烘干 ↓ 成品 ↓ 供助消化药酿造等用 ←调配 2 发酵 将试管斜面于32~34℃培养70~72h接种到500mL三角瓶每瓶一菌耳种菌摇匀于32~34℃下培养3d每24h扣瓶一次以防结块待菌体大量生长孢子转出黄绿色时即可作为种子用于制备种曲 种曲房要保持清洁并定期用硫磺和甲醛熏蒸灭菌种曲培养一般采用木制或铝制曲盒培养基经高温灭菌后放入种曲箱房打碎团块冷却到30℃左右接入05~1%的三角瓶种子拌匀后放入曲盒料层厚度1cm左右为宜盒上盖一层布后放入专用的木架上曲房内保持30℃左右进行培养盖布应每隔8~12h用水浸湿以保持一定湿度每24h扣盘一次经3d后种曲成熟麦麸上布满黄绿色孢子 厚层通风固体发酵蒸煮1h后培养基冷却到30℃接入05%的种曲拌匀后入池发酵前期品温控制在30℃左右每隔2h通风20min当池内品温上升至36℃以上时则需要连续通风使温度控制在34~36℃当池内温度开始下降后2~3h则通冷风使品温下降到20℃左右出池整个发酵过程约需要28h 2 提取 直接把麸曲在低温下烘干作为酿造工业上使用的粗酶制剂特点是得率高制造工艺简单但酶活性单位低含杂质较多 把麸曲用水或稀释盐水浸出酶后经过滤和离心除去不溶物后用酒精沉淀或硫酸铵盐析酶泥滤出烘干粉碎后加乳糖作为填充剂最后制成供作助消化药酿造等用的酶制剂特点是酶活性单位高含杂质较少但得率低成本高 二枯草杆菌BF-7658深层液体发酵α-淀粉酶生产工艺 枯草杆菌BF-7658淀粉酶是我国产量最大用途最广的一种液化型α-淀粉酶其最适温度65℃左右最适pH65左右pH低于6或高于10时酶活显著下降其在淀粉浆中的最适温度为80~85℃90℃保温10min酶活保留87% 1 生产工艺 无菌空气 BF-7658菌种 ↓ 孢子斜面 ↓ 种子罐 ↓ 发酵罐 ↑ 热处理 ↓ 盐析 ↓ 压滤 ↓ 干燥 ↓ 粉碎 ↓ 混粉 ↓ 成品 ←硫酸铵 补料罐 →硫酸铵废液 ←填充料 2 发酵 孢子培养一般采用马铃薯培养基于37℃下培养72 h使菌体全部形成孢子即为成熟 种子培养维持罐温37℃罐压05~08 atm10h后加大通风当菌体处于对数生长期后期立刻接种至大罐种子培养一般14h左右 发酵控制温度37℃罐压05 atm通气量0~12 h控制05~06 VVM12 h后控制在08~10 VVM发酵后期控制在09 VVM 发酵培养一般采用补料工艺一方面可解除分解代谢阻遏效应另一方面也有利于pH的调节最终达到提高产量的作用补料体积和基础培养基体积一般为13左右从10 h左右开始补加一般前期后期少中期大根据菌体的生长情况来调整 当pH低于65细胞生长粗壮时可酌减当pH高于65细胞出现衰老并有空胞时可酌增发酵周期一般为40 h 3 提取 工业上回收α-淀粉酶一般采用硫酸铵盐析法 硫酸铵浓度酶液的浓度和pH对盐析效果都有影响甚至α-淀粉酶来源或菌种不同对硫酸铵浓度的要求也不同如枯草杆菌α-淀粉酶的硫酸铵浓度一般为37~50%不等 第三节 氨基酸生产工艺 目前世界上可用发酵法生产的氨基酸已有20多种包括酶法生产的氨基酸发酵法已成为氨基酸生产的主要方法 一氨基酸的用途 食品工业 饲料工业 医药工业 化学工业 农业 目前生产的20多种氨基酸中产量最大的是谷氨酸约占总产量的75%其次为赖氨酸约为总产量10%其他约占15%左右 从消费构成来看食品行业的用量约占66%饲料占30%其他4% 二氨基酸的生产方法 抽提法 发酵法 合成法 酶法 生产氨基酸最早采用的生产方法 将蛋白质原料酸水解然后从水解液中抽提出氨基酸 目前最常用的生产方法 直接发酵利用微生物的作用直接将粮食原料经过发酵生产氨基酸 添加前体发酵在发酵中添加氨基酸代谢途径上的中间产物利用微生物的作用转化为
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