对比3种梅毒血清学方法筛查血液的有效性观察.docVIP

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对比3种梅毒血清学方法筛查血液的有效性观察.doc

对比3种梅毒血清学方法筛查血液的有效性观察   摘要:目的 探讨梅毒血清学方法筛查血液的临床效果。方法 选取我站2014年4月~8月无偿献血者血液标本1500份,采用TPPA(梅毒螺旋体颗粒凝集试验)、TP-ELISA(酶联免疫吸附试验双抗原夹心法)以及TRUST(甲苯胺红不加热血清反应素试验)这三种方法对所有血样予以平行检测,将TPPA法结果作为主要确诊标准,以探讨TRUST与TP-ELISA的阳性率。结果 TPPA法检测出6例阳性,TRUST法特异性为100.0%,TP-ELISA为99.80%,对比差异不明显,无统计学意义(P0.05);TRUST法灵敏度为27.41%,TP-ELISA为100.0%,对比差异明显,有统计学意义(P0.05)。结论 TRUST法有较高漏检率,且灵敏度低,不适合筛查献血者血液;TPPA法则在确证梅毒阳性标本中比较适用;TP-ELISA法有优良特异性与高灵敏度,在批量较大样本中使用具有自动化检测与集中化优点,可用于筛查献血者血液,但在献血者召回中只能做为参考方法。   关键词:梅毒血清学;血液;TP-ELISA;TRUST;TPPA   梅毒属于性传播疾病,其主要诱因为梅毒螺旋体感染。梅毒主要传播方式为血液传播与性传播,且病情具有时显时隐特征,可对全身各个器官或者组织进行侵犯,亦可在胎盘传播下导致胎传梅毒[1]。对梅毒蔓延予以有效控制的关键在于快速且精准的实验室检查,因此在对梅毒螺旋体予以检测时一定要选用最科学的方法,作为采供血机构,既要保护献血者,又要保证献血安全。当前发现并诊断梅毒最主要的方法为血清学检测,且方法较多,各有优劣。本文为探讨TPPA、TP-ELISA以及TRUST检测梅毒螺旋体的效果,选取我站无偿献血者标本1500份,回顾性分析其资料,将详细情况报告如下。   1资料与方法   1.1一般资料 选取我站2014年4月~8月无偿献血者血液标本1500份,所有献血者在献血前均接受体格检查,按照《献血者健康要求》判定为合格。   1.2检测方法 采用TPPA、TP-ELISA以及TRUST这三种方法对所有血样予以平衡检测,将TPPA法结果作为主要确诊标准,以探讨TRUST与TP-ELISA的阳性率。双孔复查TPPA法阳性样本,若结果仍为阳性则代表梅毒阳性。   1.2.1TRUST主要用于性病研究实验室开展,将抗原在有特制甲苯胺红溶液中重悬后制作,试验于特制白色卡片上,以对血浆或者血清进行检验。先使用生理盐水对血清进行倍比稀释,再开展定量试验,用专用针头与滴管分别对TRUST试剂予以滴加,加入血清后摇动,速度为100转/min,持续8min后对结果予以观察,试验条件主要为23~29℃。   1.2.2 TPPA试验载体主要为生物红细胞,对TP粉碎物予以吸附后对血清中抗体进行抗原检测,且在人工载体明胶颗粒上对存在于致病性梅毒(纯化)中的精致菌株成分进行包被,降低生物学假阳性率,存在非特异性凝集现象但是出现率极低。   1.2.3 TP-ELISA主要制成试剂包括混合酶标记基因工程抗原、包被于梅毒螺旋体基因工程混合抗原的微孔反应板以及其他试剂,主要使用双抗原夹心法检测。在实验中均需设置阴阳性对照组孔(各3个)与空白对照组孔(1个),添加样本后孵育于37℃条件下,60min后洗板加酶,30min后再将底物添加进去以显色,主要使用的酶标仪为SUNRISE 450/630nm,空白置零后对各个孔吸光度值予以读取。   1.3统计学方法 应用软件SPSS21.0对所有数据行统计学处理,若P0.05代表差异存在统计学意义。   2结果   TPPA、TP-ELISA以及TRUST梅毒血清学试验结果对比:1500份样本采用上述3种方式检测后有1例同时阳性,TPPA、TP-ELISA两种检测法6例同时阳性,TPPA以及TRUST1例同时阳性,TP-ELISA单种检测法阳性例数为3例,见表1。   3讨论   梅毒螺旋体主要于人体脊液或者血液中存在,不会生长繁殖于人工培养基上[2]。梅毒有先天性与后天性之分,先天性主要是胎儿被母体传播或者被血液感染,后天性感染方式主要为性传播。机体遭受梅毒病毒感染后3~6w检查患者血清会发现有两种抗体存在,其一为非螺旋体抗原抗体,其二为螺旋体抗原抗体。梅毒特异性抗体具有很早出现与很迟消失的特点,就算患者接受了正规抗梅毒疗法,再行血清检测时还是可将特异性抗体检测出来,有些甚至具有终身性。在对梅毒螺旋抗体感染进行诊断时主要依据为抗-TP,临床检测梅毒病毒主要采用血清学试验,包括TPPA、TP-ELISA、TRUST以及化学发光免疫分析法等。   据临床研究证实[3,4],在梅毒螺旋体中其表面抗原分类较多,分类依据主要为相对分子质量,

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