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基因进入受体细胞的载体 作用:将外源基因送入受体细胞。 种类:质粒、噬菌体、动植物病毒。 条件: 质 粒 基因工程过程示意图 思考 假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样? 作为载体没有切割位点将怎样? 目的基因是否进入受体细胞,你如何察觉? 如果载体对受体细胞有害将怎样? 有切割位点 能自我复制 能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达; 有遗传标记基因 能与目的基因结合 对受体细胞无害 比较容易得到 载体的条件 什么是质粒 存在于细菌以及酵母菌等生物中 细菌拟核DNA外(细胞染色体外)能自主复制的裸露的、结构简单、双链环状DNA分子 细菌的质粒比细菌DNA小得多 带有少量基因 常有抗生素抗性基因,使细菌有抗药性 质粒与宿主细胞的关系 质粒的存在对宿主细胞无影响 质粒的复制只能在宿主细胞内完成 质粒(最常用的运载体) 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 有标记基因的存在,将来可用含青霉素的培养基鉴别。 提 连 转 增 检 基因工程的一般过程 ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ①从细胞中分离出DNA ②限制酶截取DNA片断 ③分离大肠杆菌中的质粒 ④ DNA重组 ⑤用重组质粒转化大肠杆菌 ⑥培养大肠杆菌克隆大量基因 如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图,据图回答下列问题。 例3 (1)a代表的物质和质粒的化学本质相同,都是________, 二者还具有其他共同点,如 ①________________________________________________, ②___________________________________ (写出两条即可)。 (1)DNA 能够自我复制 具有遗传效应 (2)若质粒DNA分子的切割末端为—A,—TGCGC),则与之连接的目的基因切割末端应为________;可使用________把质粒和目的基因连接在一起。 (3)氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上称为________,其作用是______________________________________________。 (3)标记基因 供重组DNA的鉴定和选择 (4)下列常在基因工程中作为载体的是( ) A.苏云金芽孢杆菌抗虫基因 B.土壤农杆菌环状RNA分子 C.大肠杆菌的质粒 D.动物细胞的染色体 C 【解析】 质粒是基因工程中最常用的载体,是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子,具有一至多个限制酶切割位点,进入受体细胞后能自主复制,具有标记基因便于重组DNA的鉴定与选择。 【答案】 (1)DNA 能够自我复制 具有遗传效应 (2) (3)标记基因 供重组DNA的鉴定和选择 (4)C 评价反馈 1.科学家们经过多年的努力创立了一种新兴生物技术---基因工程,实施该工程的最终目的是( ) A.定向提取生物体的DNA分子 B.定向地对DNA分子进行人工“剪切” C.在生物体外对DNA分子进行改造 D.定向地改造生物的遗传性状 D 2.下列有关基因工程中限制性内切酶的描述错误的是( ) A.一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B.限制性内切酶的活性受温度的影响 C.限制性内切酶能识别和切割RNA D.限制性内切酶可从原核生物中提取 C 3.关于限制性核酸内切酶的说法中正确的是( ) A.限制性核酸内切酶是一种酶,只识别GAATTC序列 B.EcoRⅠ切割的是G-A之间的氢键 C.限制性核酸内切酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA D.限制性核酸内切酶只存在于原核生物中 C 4.DNA连接酶的重要功能是( ) A.DNA复制时母链与子链间形成氢键 B.将两DNA片段之间的缝隙连接起来 C.黏性末端互补碱基间形成氢键 D.A、B、C三项都不正确 B 5.关于限制酶和DNA连接酶的说法中正确的是( ) A.其化学本质都是蛋白质 B.DNA连接酶可恢复DNA分子中的氢键 C.在基因工程中DNA聚合酶可以替代DNA连接酶 D.限制酶切割后一定能产生粘性末端 A 6.在基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段,需使用( ) A.同种限制酶 B. 两种限制酶 C.同种连接酶 D. 两种连接酶 A 7.不属于质粒被选为基因运载体的理由是( ) A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 8.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是 ( ) A、人工合成目的基因
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