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* * 第06次实验 细菌的染色与形态结构的观察 生物工程系 龙中儿 细菌染色法 死菌 正染色 负染色 荚膜染色法等 简单染色法 鉴别染色法 革兰氏染色法 抗酸性染色法 芽孢染色法 姬姆萨染色法 活菌 用美蓝或TTC(氧化三苯基四氮唑)等染色 革兰氏染色 丹麦医生Hans Christian Gram于1884年发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法。 1.用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染 2.用碘溶液进行媒染,其作用是提高染料和细 胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。 3.用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色后 仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细 菌,而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉,细 胞呈无色。 4.用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对 涂片进行复染。例如沙黄,它使原来无色的 革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色,而革 兰氏阳性细菌继续保持深紫色 革兰氏染色(的过程) 革兰氏染色 一、实验目的 学习微生物涂片、染色的基本技术,掌握细菌的简单染色法和革兰氏染色法的基本原理及其染色技术 认识微生物的基本形态 了解革兰氏染色法在细菌分类中的重要性 学习并掌握显微镜油镜的原理和使用方法 二、实验方法 1. 简单染色法 涂片 干燥 固定 染色 水洗 干燥 镜检 2. 革兰氏染色法 二、实验方法 涂片 干燥 固定 初染 水洗 媒染 水洗 脱色 水洗 复染 水洗 镜检 1min 1min 0.5min 3. 显微镜油镜的使用 二、实验方法 3. 显微镜油镜的使用 二、实验方法 显微镜的安装 光源调节 目镜调节 聚光器数值 孔径的调节 显微观察 低倍镜观察 高倍镜观察 油镜观察 显微镜用毕后的处理 显微镜用毕后的处理: 上升镜筒,取下载玻片 用擦镜纸拭去镜头上的镜油 用蘸有少量二甲笨的擦镜纸擦去镜头上残留的油迹,然后再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯 用擦镜纸清洁其他物镜和目镜,用稠布清洁显微镜的金属部件 显微镜各部件还原 三、实验内容 细菌的简单染色法染色 细菌的革兰氏染色法染色 * * * * *
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