实验一 索氏抽提法课件.ppt

实验一 索氏抽提法测定粗脂肪含量 一、实验目的 了解索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理 掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量操作方法。 测定脂肪的含量，可以作为鉴别样品品质优劣的一个指标。 二、实验原 理 脂肪含量的测定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。 目前国内外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractormethod）是公认的经典方法，也是我国粮油分折首选的标准方法。 本实验采用索氏抽提法中的残余法，即用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质，因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。 三、实验材料、主要仪器和试剂 1．实验材料 油料作物种子(花生)、中速滤纸. 2．仪器 （1）SZF-06A脂肪仪 （2）干燥器(直径15～18cm，盛变色硅胶) （3）不锈钢镊子（长20cm）（4）培养皿 （5）分析天平 （6）称量瓶（7）恒温水浴 （8）烘箱（9）样品筛（60 目） 3．试剂 无水乙醚或低沸点石油醚（A.R.） 四、操作步骤 1．准备 1) 将滤纸切成8cm×8cm，叠成一边不封口的纸包，用硬铅笔编写顺序号，按顺序排列在培养皿中。将盛有滤纸包的培养皿移入105±2℃烘箱中干燥2h，取出放入干燥器中，冷却至室温。 2)按顺序将各滤纸包放人同一称量瓶中称重（记作a）、(称量时室内相对湿度必须低于70％)。 2．包装和干燥 将花生研碎,放入105±2℃的烘箱中干燥3h，移至干燥器中冷却至室温。称取约3g 左右研细的样品放入上述已称重的滤纸包中装入，封好包口，按顺序号依次放入称量瓶中称重（记作b）。 四、操作步骤 3．抽提 将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中，注入一次虹吸量的1.67 倍的无水乙醚，使样品包完全浸没在乙醚中。连接好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恒温水浴中进行抽提，调节水温在70～80℃之间，使冷凝下滴的乙醚成连珠状（120～150 滴/min 或回流7次/h 以上），抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止（约需6～12h）。抽提完毕后，用长镊子取出滤纸包，在通风处使乙醚挥发（抽提室温以12～25℃为宜）。提取瓶中的乙醚另行回收。 4．称重 待乙醚挥发之后，将滤纸包置于105±2℃烘箱中干燥2h，放入干燥器冷却至恒重为止（记作c）。 五、结果与计算 式中：a：称量瓶加滤纸包重（g） b：称量瓶加滤纸包和烘干样重（g） c：称量瓶加滤纸包和抽提后烘干残渣重（g） 六、注意事项 1、测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理。这是因为：第一，抽提体系中有水，会使样品中的水溶性物质溶出，导致测定结果偏高；第二，抽提体系中有水，则抽提溶剂易被水饱和（尤其是乙醚，可饱和约2％的水），从而影响抽提效率；第三，样品中有水，抽提溶剂不易渗入细胞组织内部，结果不易将脂肪抽提干净。 2、试样粗细度要适宜。试样粉末过粗，脂肪不易抽提干净；试样粉末过细，则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失，影响测定结果。 3、索氏抽提法测定脂肪最大的不足是耗时过长，如能将样品先回流1～2 次，然后浸泡在溶剂中过夜，次日再继续抽提，则可明显缩短抽提时间。 六、注意事项 4、YG-Ⅱ型油分测定器容量大，适合于样品较多的选种鉴定工作使用，温度控制在70℃左右，8h 可提取完毕。 5、必须十分注意乙醚的安全使用。抽提室内严禁有明火存在或用明火加热。乙醚中不得含有过氧化物，保持抽提室内良好通风，以防燃爆。 乙醚中过氧化物的检查方法是：取适量乙醚，加入碘化钾溶液，用力摇动，放置1min，若出现黄色则表明存在过氧化物，应进行处理后方可使用。处理的方法是：将乙醚放入分液漏斗，先以1/5 乙醚量的稀KOH溶液洗涤2～3 次，以除去乙醇；然后用盐酸酸化，加入1/5 乙醚量的FeSO4 或Na2SO3 溶液，振摇，静置，分层后弃去下层水溶液，以除去过氧化物；最后用水洗至中性，用无水CaCl2 或无水Na2SO4 脱水，并进行重蒸馏。 七、思考题 1．如何利用残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量？ 2．测定过程中为什么需要对样品、抽提器、抽提用有机溶剂都要进行脱水处理？ 3．在实验过程中安全使用乙醚应注意哪些问题？ 4．测定样品粒子粗细有什么要求？ * *