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四、伤寒病理模型的建立方法 （一）吴茱萸汤对肝寒犯胃家鸽呕吐模型的防治作用的实验观察 1.名称：吴茱萸汤对肝寒犯胃家鸽呕吐模型的防治作用 2.目的：研究吴茱萸汤对肝寒犯胃家鸽呕吐模型的防治作用 3.实验材料：5ml注射器，8号导尿管，手表，压舌板；吴茱萸汤水煎液1g/ml（吴茱萸汤组成：吴茱萸10g，党参10g，生姜20g，大枣15g。取吴茱萸汤全方加水500ml浓煎取汁55ml。）吴茱萸水煎液0.6g/ml(吴茱萸10g加水250ml,浓煎取汁16.7ml)；胆矾水溶液20mg/ml(胆矾由广州市药材公司提供)。 4.实验对象：体重300至400克健康家鸽（雌雄不限）。 5.实验环境：温度20~25℃，湿度60~80%。 6.操作步骤 ①取健康家鸽30只，随机分为甲乙丙三组：吴茱萸汤全方组（甲组）、吴茱萸单味组（乙组）、冷开水对照组（丙组），每组各10只，均贴好标签，禁食12小时。以胆矾水溶液给家鸽灌胃，因为胆矾的主要成分为硫酸铜，其味酸辛性寒，易于寒伤脾胃，故可造成肝寒犯胃之呕吐模型。而吴茱萸汤温中散寒降逆止呕,故可以本实验观察其温胃止呕作用。 ②两人合作，一人取做位，左手握住家鸽，右手食指与大拇指环绕其后颈，固定头部，另一人将压舌板横放于鸽口中，以8号导尿管由舌上插入食道约15cm。然后以注射器注入药液（甲组注入吴茱萸汤水煎液，乙组注入吴茱萸水煎液，丙组注入冷开水。）一次，体积均按10ml/kg。 ③给药后一小时，每鸽灌服胆矾200mg/kg,完毕立即计下时间，记录各鸽出现第一次呕吐的时间（呕吐潜伏期）和给胆矾水溶液后1小时内呕吐的次数（呕吐频率）。观察吴茱萸汤和吴茱萸对家鸽灌服胆矾水溶液所致呕吐的影响，所得资料进行统计学检验。 7.实验结果 吴茱萸汤对肝寒犯胃家鸽呕吐模型的影响（±s） 药物??? 例数??? 呕吐潜伏期? 干呕总次数?? 呕吐次数?? 呕吐量?? 呕吐物性状??? 其它 ????????????????? （分）??????????????????????????? （mL） ? 甲组 乙组 丙组 注：乙、甲比较，p????????? ；丙、乙比较，p???????????? 。 8、模型评价 出现呕吐物或干呕5次/分钟即为模型成功。 9、注意事项：为避免误入气管，可将导尿管外口浸入水中，不见气泡表示插入胃中。 （二）少阴病阳虚水停证家兔模型的建立 1、名称：少阴病阳虚水停证家兔模型 2、目的：建立类似于伤寒论少阴病阳虚水停证的动物模型。 3、实验材料：①寒凉药灌胃液的制备：石膏和知母按2:1.5比例配伍，常规水煎两次，浓缩成100%水煎液，于4℃保存。②升主动脉缩窄环：环由两层组成，外层用硬质铝片，宽约3mm，厚约1.2mm,长度1.8-2.4cm,以0.1cm递增预备各种长度不等的铝片备用。操作时长度以每个动物升主动脉周径的2/3为宜。内层为能吸水膨胀的两片干海带。两层周围包绕一层塑料膜密封。用之前，在塑料膜上用针头刺多个针眼以便环内层材料逐渐吸水膨胀，而达到升主动脉逐渐缩窄与压迫的目的。③手术器械。④RM-6000四道生理记录仪（日本产）。⑤7071型半导体点温度计（上海产）。⑥动物人工呼吸机（江西）。 4、实验对象：体重2.0-3.0kg新西兰家兔，雌雄兼用， 5、实验环境：温度20~25℃，湿度60~80%。 6、操作步骤 ①在实验时每天灌服寒凉药1次，剂量为7ml/kg（7g/kg），相当于按人体表面积计算后剂量的7倍左右，连续7天。②于第8天将兔固定于手术台上，用脱毛剂脱去胸部毛发，酒精、碘酒常规消毒3次，2%普鲁卡因局部麻醉，在无菌条件下，沿胸骨左缘切开皮肤、肌肉，剪断第2、3肋骨，用开胸器撑开暴露心脏，注意避免损伤胸膜及剪破心脏。再夹住心耳部，稍提起，暴露冠状动脉，在冠状动脉起始部下0.5cm处，用丝线结扎左冠状动脉前降支，为防侧枝循环，再在结扎处的下方约1cm处再行结扎。然后用血管分离钳分离主动脉，用自制缩窄环套住升主动脉，使两端相接，环的长度较升主动脉周径的2/3长1-2mm（从而缩窄升主动脉1/3，几天后，因海带吸水发泡可使升主动脉口径缩小至原来的1/3左右）。关闭心包膜和胸腔，缝合切口。整个手术期间均维持兔的自主呼吸。③以青霉素40万单位肌注，每天2次，连续3天。如兔不进食，则以5%葡萄糖5-10ml静脉注射，每天2-3次。7-10天后观察。④在造模后不同时间以半导体温度计测定腹部及肢体（左后足、右前足）温度。可见在手术后第七天肢体温度降低。动物出现倦卧、活动减少、毛发枯燥、口及耳部发绀、足部水肿。⑤手术后第七天，再以3%戊巴比妥钠麻醉，按心电图测定法测动物肢体导联心电图。切开颈部皮肤，分离颈总动脉，从左颈总动脉插入充满肝素的导管至左心室，导管的另一端与压力传感器相连，固定导