生命科学前沿专题---李培金解读.ppt

“我还没有发现在哪个领域内，有哪种技术能够像CRISPR技术这样发展得如此迅猛。” ——美国蒙大拿州立大学Blake Wiedenheft “ CRISPR方法真心很强大，现在我们实验室几乎每一项目都会用到这项技术。” ——麻省理工学院科赫研究所综合癌症研究中心的 Tyler Jacks CRISPR: 名词 》》》动词 Orthogonal gene knockout and activation with a catalytically active Cas9 nuclease. Dahlman JE, Abudayyeh OO, Joung J, Gootenberg JS, Zhang F, Konermann S.?Nat Biotechnol.?Oct 5. (2015). 33(11):1159-1161. Cpf1 Is a Single RNA-Guided Endonuclease of a Class 2 CRISPR-Cas System.Zetsche B, Gootenberg J, Abudayyeh O, Slaymaker I, Makarova K, Essletzbichler P, Volz S, Joung J, Oost J, Regev A, Koonin E, Zhang F.?Cell?Sep 25. (2015). BCL11A enhancer dissection by Cas9-mediated in situ saturating mutagenesis.Canver MC, Smith EC, Sher F, Pinello L, Sanjana NE, Shalem O, Chen DD, Schupp PG, Vinjamur DS, Garcia SP, Luc S, Kurita R, Nakamura Y, Fujiwara Y, Maeda T, Yuan GC, Zhang F, Orkin SH, Bauer DE.?Nature?Sep 16. (2015). Crystal Structure of Staphylococcus aureus Cas9.Nishimasu H, Cong L, Yan WX, Ran FA, Zetsche B, Li Y, Kurabayashi A, Ishitani R, Zhang F, Nureki O.?Cell?Aug 27. (2015). 162(5):1113-26. doi: 10.1016/j.cell.2015.08.007. A Genome-wide CRISPR Screen in Primary Immune Cells to Dissect Regulatory Networks.Parnas O., Jovanovic M., Eisenhaure TM., Herbst RH., Dixit A., Ye CJ., Przybylski D., Platt RJ., Tirosh I., Sanjana NE., Shalem O., Satija R., Raychowdhury R., Mertins P., Carr SA., Zhang F., Hacohen N., Regev A.?Cell?Jul 15. (2015). pii: S0092-8674(15)00829-6. ----/team.html  参考文献 2007年，Danisco这家来自丹麦哥本哈根的食品原料公司（现在该公司已经被 DuPont公司收购）的科学家们发现了一种方法，能够极大地增强工业细菌对噬菌体的抵抗力。他们的方法就是用噬菌体来免疫细菌，结果取得了很不错的效果（Science , 23 March 2007, p. 1650）。 DuPont公司收购了 Danisco公司之后，利用这种技术培育出了抵抗力更强的工业生产用菌。而且这项工作还证明，细菌也是拥有适应性免疫系统（adaptive immune system）的，而且依靠这种免疫机制抵抗同一种噬菌体的多次攻击。 2013以后，研究者们在包括《science》和《nature biotechnology》等著名杂志上发表多篇文章介绍CRISPR-Cas系统，并且已成功在人类、小鼠、斑马鱼等物种上实现精确的基因修饰。 1、 CRISPR-Cas系统的发现 CRISPR-Cas是很多细菌和大部分古生菌的天然免疫系统，通过对入侵的病毒和核酸进行特异性的识别，利用Cas蛋白进行切割，从而达到