电镜细胞化学（研）课件.pptVIP

  定义： 电子显微镜细胞化学是从光镜组织化学的基础上发展起来的一种超微结构技术，是利用特定的化学显色反应，形成高电子密度、不溶性的反应产物沉淀在细胞原位，借助电子显微镜进行超微结构的原位分析。它主要用于研究细胞内各种成份在细胞超微结构水平的分布情况，以及这些成份在细胞活动过程中的动态变化，以阐明细胞的化学和生化功能以及各种细胞成份在生理、病理情况下与细胞结构和功能等之间的关系。   第一节 透射电镜简介 一、透射电镜的原理 （一）光学显微镜分辨率的极限 （二）透射电镜的产生 （三）透射电镜和光学显微镜比较  二、常规超薄切片技术 [操作步骤]： ① 取材 ② 醛类试剂前固定，０～４℃，4h， ③ 0.1 mol/L磷酸缓冲液（PBS）振荡漂洗3次，每次10min， ④ 鋨酸后固定，０～４℃，2h，  ⑤ 0.1 mol/L PBS振荡漂洗3次，每次10min， ⑥ 50％乙醇→70％乙醇→95％乙醇→100％乙醇→无水丙酮→无水丙酮依次脱水，每次振荡脱水10min, ⑦ 浸透及包埋， ⑧ 半薄切片定位， ⑨ 超薄切片， ⑩ 醋酸铅和柠檬酸铀电子染色。 第二节 免疫电镜技术 定义 免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物，利用抗原抗体反