第二篇生物制药工艺技术基础.pptVIP

为防止或减少包含体的形成常用方法： （1）降低培养温度 从37℃降到30℃可显著降低包含体形成率。 （2）以硫氧还原蛋白为载体进行融合表达。 硫氧还原蛋白是E.coil的一种同源蛋白，定位于粘附区，富含-SH,可保目的蛋白不发生分子错误折叠，是一种热稳定蛋白，表达产物聚集于粘附区，通过振扰提取使产物进入介质中，再酶解就得到目的蛋白。 三、酶工程制药技术基础 1、酶工程(enzyme engineering) 研究内容 （1）酶的发现、分离纯化与生产应用。 （2）酶与细胞的固定化技术与酶反应器。 （3）生物酶工程：以基因工程技术和蛋白质工程技术研究酶工程。 （4）抗体酶、模拟酶 合成酶及酶的人工设计。 （书P102） 2、固定化酶(immobilized enzyme) （1）固定化稳定性提高 （2）可重复使用、提高使用效率、降低成本 （3）提高强度，便于连续、自动、规模化生产 （4）便于产物的分离、纯化 共价键结合 酶 固定化 间歇 可溶 交联 包埋 吸附 间歇 连续 酶的固定化技术和固定化酶 3、制备方法： （1）吸附法：分为物理吸附法和离子交换吸附法 （2）包埋法：将酶或细胞定位于凝胶高聚物网络中，如卡拉胶，海藻胶，聚丙烯酰胺 （3）共价键结合法：酶分子与载体分子，通过化学偶联使酶与载体共价结合。 （4）交联法：用