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基因工程发展过程
基
因
工
程
发
展
过
程
专业:10级植物科学与技术2班
学号:1007103054
姓名:杨少峰
基因工程的发展过程
现今生活中经常提到转基因植物、转基因食品、转基因动物等。可以说转基因已经充斥了我们的生活。下面简要介绍一些基因工程的发展以加深我们对转基因的理解。
关于基因工程的定义有很多版本,本人认为基因工程是一门技术,一门在体外重组DNA的技术。狭义上说是指将一种或多种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿遗传并表达出新的性状甚至创造新的物种。基因工程概念更倾向于工程学的范畴DNA重组技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的是外源基因重组、克隆和表达的设计与构建(即狭义的基因工程);而下游技术则涉及到含有重组外源基因的生物细胞(基因工程菌或细胞)的大规模培养以及外源基因表达产物的分离纯化过程1944年,Avery进行的肺炎双球菌转化实验,证明了基因的分子载体是DNA,而不是蛋白质;1952年,Alfred Hershy和Marsha Chase通过噬菌体转染实验证明了遗传物质是DNADNA双螺旋结构和半保留复制1953年,James D. Watson和Francis H.C.Crick揭示了DNA分子的双螺旋结构和半保留复制机制。中心法则和遗传密码1957,Crick又提出了遗传信息传递的“中心法则”;1964年,Marshall Nirenberg和Gobind Khorana破译了64个遗传密码子。不同基因具有相同的物质基础所有生物的DNA的基本结构是相同的。因此,不同生物的基因(染色体上具有遗传功能的特定核苷酸序列或DNA片段)是可以重组互换的基因是可以切割的除少数基因重叠排列外,大多数基因之间有间隔序列,可以从DNA分子上切割下来。重叠排列的基因也可以切割,只不过是破坏了其它基因。
基因是可以转移和重组的生物体内的某些基因可以移动,甚至可以在不同的染色体间进行跳跃,插入到靶DNA分子中去遗传密码是通用的基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代琼脂糖凝胶电泳1960s,发明了琼脂糖凝胶电泳,可将不同长度的DNA分离开。DNA连接酶1967年,有5个实验室几乎同时发现了DNA连接酶限制性核酸内切酶(restriction enzymes)的发现和应用1970年,H.O.Smith等人分离出第一种限制性核酸内切酶。载体1972年前后,使用小分子量的细菌质粒和λ噬菌体作载体1972年,美国的Berg和Jackson等人将猿猴病毒基因组SV40 DNA、l噬菌体基因以及大肠杆菌半乳糖操纵子在体外重组获得成功。翌年,美国斯坦福大学的Cohen和Boyer等人在体外构建出含有四环素和链霉素两个抗性基因的重组质粒分子,将之导入大肠杆菌后,该重组质粒得以稳定复制,并赋予受体细胞相应的抗生素抗性,由此宣告了基因工程的诞生。正如Cohen在评价其实验结果时指出的那样,基因工程技术完全有可能使大肠杆菌具备其它生物种类所固有的特殊生物代谢途径与功能,如光合反应和抗生素合成等。出人意料的是,当时科学界对这项新技术诞生的第一个反应便是应当禁止有关实验的继续开展,其严厉程度远大于今天人们对人体克隆的关注。包括Cohen本人在内的分子生物学家们都担心,两种不同生物的基因重组有可能为自然界创造出一个不可预知的危险物种,致使人类遭受灭顶之灾。于是,1975年西欧几个国家签署公约,限制基因重组的实验规模。第二年美国政府也制订了相应的法规。至今世界上仍有少数国家坚持对基因重组技术的使用范围进行严格的限制。然而,分子生物学家们毕竟不愿看到先进的科学技术葬送在自己手中。从1972年到1976年短短的四年里,人们对DNA重组所涉及的载体和受体系统进行了有效的安全性改造,包括噬菌体DNA载体的有条件包装以及受体细胞遗传重组和感染寄生缺陷突变株的筛选,同时还建立了一套严格的DNA重组实验室设计与操作规范。众多安全可靠的相关技术支撑以及巨大的潜在诱惑力,终于使DNA重组技术走出困境并迅速发展起来。
早在基因工程发展的初期,人们就已开始探讨将该技术应用于大规模生产与人类健康水平密切相关的生物大分子,这些物质在人体内含量极小,但却具有非常重要的生理功能。1977年,日本的Tfahura及其同事首次在大肠杆菌中克隆并表达了人的生长激素释放抑制素基因。几个月后,美国的Ullvich随即克隆表达了人的胰岛素基因。1978年,美国Genentech公司开发出利用重组大肠杆菌合成人胰岛素的先进生产工艺,从而揭开了基因工程产业化的序幕。上世纪八十年代以来,基因工程已开始朝着高等动植物物种的遗传特征改良以及人体基因治疗等方向发展。19
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