靶向细胞周期蛋白e的shrna真核表达载体的构建和鉴定.docVIP

靶向细胞周期蛋白E的shRNA真核表达载体的构建和鉴定 【摘要】 　　［目的］ 构建靶向细胞周期蛋白E的shRNA真核表达载体。［方法］ 针对cyclin E基因，设计1对寡核苷酸，形成双链后将其将其插入Psilencer2.1-U6-neo质粒，构建cyclin E shRNA真核表达载体，酶切和测序鉴定。转染MCF-7细胞株，应用western blot检测cyclin E蛋白的表达。［结果］ 酶切和测序结果显示，成功构建特异性针对cyclin E的shRNA 表达质粒。转染MCF-7细胞后下调cyclin E的表达。［结论］ 成功构建靶向cyclin E的shRNA真核表达载体，为进一步应用RNAi技术进行肿瘤基因治疗的研究提供实验基础。 【关键词】 细胞周期蛋白E　短发卡结构状RNA　RNA干扰 　　 Construction and Identification of shRNA Expression Vector Specific for Cyclin E Abstract: ［Purpose］ To construct the short hairpin RNA （shRNA） expression vector specific for cyclin E. ［Meth