RT-PCR法克隆大白菜CaMBP-10的cDNA序列.docVIP

南开大学 硕士学位论文 RT-PCR法克隆大白菜CaMBP-10的cDNA序列 姓名：薜玲 申请学位级别：硕士 专业：生物化学 指导教师：凌启阆;刘华 2000.5.1  摘 要 ? 实现的，故??谠唇岷系鞍椎难芯慷杂谧钪詹?魃?锾迥诘腃?＃疌?信号 传导系统具蠢重要意义。但羁羲鸯关植物细胞孛镪调素结合蛋白的研究极为有 限，在鉴别、结构及功能研究方面几乎皆朱获得有价值的信息，这严重阻碍了 对棱物细胞审???余导的精密调节过程锥出全面系统的阐述。扩—一 ? 及所显示的重要细胞功能等来看，为一种浙的国内外均米见报道的具有蘩要生 热稳定姓痿及层榜彳亍秀谤方面与转赌蛋虫砖一墩挂，我缃据北劾步认为： 面认识。  ?：竖羔苎生竺垄叟要??坠?丝型??生型 一 ???? ???????????? ? ?? ? ? ?? ? ?????????????瑃? ? ??? ??? ?? ? ?????? ?? ??? ????? ? ?? ???? ? ??? ? ? ?????? ??? ???? ????? ? ?? ??????????? ? ???? ?? ???? ? ???? ??????????? ?? ??? ?? ? ????? ? ? ???? ????? ????? ? ??? ? ? ???? ?? ?? ?????? ???，? ? ???? ?? ????????， ??猻??? ? ?????? ???? ???????? ?????? ?? ? ?? ?? ??? ? ??? ? ??? ??? ? ? ? ??? ??? ?? ???? ?????瑃? ?????? ??? ??? ?? ??? ????? ??? ???? ? ??? ??? ?? ?? ? ?? ? ????? ??? ??? ?  ～ 钙离子作为细胞信号转导分子，在生物细胞中所起的关键作用已得到广泛 的认可。目前就植物而言，?笕允俏ㄒ蝗分さ男藕糯ǖ挤肿?????等．??， ???和???，??，????和??????珺?????。植物体内的许多 生理活动都与?”密切相关，如离子平衡、细胞质流动、器官极性发育、花粉 管生长、碳水化合物代谢、有丝分裂、基因表达以及对生长素和损伤的反应 ???????蚑???????。在静息条件下，植物细胞内??浓度在 ? 而引发一系列生理生化反应????虷??????珺?????。 真核生物中钙离子的调节功能是通过与其靶蛋白一钙调节蛋白的结合而得 广泛、最重要的调节功能，它作为主要的钙受体蛋白参与多种酶和众多细胞过 形?疽宦菪??恿礁銮蜃碿??岷锨?虻男⊙屏逍头肿????取?????、。 合，参与众多细胞过程和生理功能的调节????虷??????珺?????。 钙调素本身没有任何酶功能，它在生物体内的诸多调节功能是通过与其结 内的复杂调节机制具有重要意义。钙调素结合蛋白????从广义上说是指 能和??岷系乃?械鞍祝??ㄒ丫?范ㄆ浠钚灾苯邮蹸?控制的各种酶类， 目前，有关动物细胞中的钙调素结合蛋白的信息较多。到??年为止，已 经发现?余类钙调素结合蛋白，其中包括各种代谢酶、蛋白激酶、膜载体、转 中的许多生理过程。但是目前有关植物细胞中钙调素结合蛋白的研究极为有限，   ?一????┛诵纷甙纵????一?的??序列 结合蛋白的研究方面大多还停留在结合蛋白的存在与否，以及定性比较在不同 等，???友滩荨⑼炼购湍饽辖娌酥蟹掷氲玫搅吮嗦隒?结合蛋白的??克 隆的全长或部分序列，但在功能研究方面仍未获得有价值的信息，这严重阻碍 发现新的植物??谠唇岷系鞍祝?芯科湫灾屎徒峁固氐悖??髌湓贑??疌? 调节体系中的功能作用是目前极其重要、极具挑战性的研究领域 ??。 由于钙调素是通过与多种蛋白??ò忻负徒岷系鞍?的结合，实施其调 题?’??和???????琑??等，???＞」蹸?的一级结构在植物、 动物和酵母间是高度保守的，但近年来，随着一些???的氨基酸顺序的阐 ????????，并已确认这种??峁刮狢?．结合结构域的结构特点 ???????，?疦??虳???，??，?和?????，??，?等、??， ??结合结构域 为亲水残基，另一例为疏水残基的螺旋轮状投影???珺? 于结合蛋白和??母咔缀托钥赡娼岷??????虲????????．有 的结合有高度的亲和性和广泛的特异性?’??和???????。目前，对 ???的??岷辖峁褂虻男畔⒅痪窒抻诙?锏鞍祝??灾参镏械腃?靶蛋 遣成植物钙调素结合蛋白鉴定、功能和结构研究严重滞迟的一个重要原因， 到很大的制约，而分子生物学途径，因其固有的特点显示着十分诱人的前景。  它具有热稳定性，表观分子董为????菝??狢??。???ü