菊花的组织培养课题.ppt

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* 菊花的组织培养 一、细胞的全能性 1、植物学家将胡萝卜的韧皮部细胞分离出来,将单个细胞放在特定的培养基中培养,获得了许多完整的植株,这些植株的特点是( ) A.彼此性状极为相似 B.都是单倍体植株 C.植株的变异频率较高 D.都是纯合体植株 2、根据分裂潜能,干细胞可分为全能干细胞(可发育成完整的个体)、多能干细胞(可发育成多种组织和器官)和专能干细胞(发育成专门的组织和器官),则这些细胞在个体发育中的分化顺序是( ) A.全能——专能——多能 B.全能——多能——专能 C.多能——全能——专能 D.专能——全能——多能 Ⅰ、所谓细胞全能性,是指细胞如受精卵一样,具有经过分裂、分化形成各种组织和细胞,最终发育成一个完整的个体的能力;细胞核全能性则指细胞虽不具备发育成一个完整个体的能力,但是当将其细胞核通过核移植等方法导入去核的卵细胞或受精卵,经过受体卵细胞质的诱导去分化、体细胞核和受体卵细胞质共同作用,依然可能发育成一个完整的个体。因此,细胞全能性和细胞核全能性是两个完全不同的概念,不能混为一谈。细胞核的全能性并不代表细胞具有全能性。 Ⅱ、植物体细胞具有全能性 低等动物的细胞和高等动物早期胚胎细胞具有发育全能性 高等动物的体细胞核具有发育全能性 高等动物的体细胞是否具有全能性?——一个还没有最后结论的话题 二、植物组织培养的过程 离体的植物组织或细胞 愈伤组织 根和芽 完整的植物体 脱分化 再分化 三、影响植物组织培养的因素 1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等 3、植物激素 生长素细胞分裂素 有利于芽的形成 生长素细胞分裂素 有利于根的形成 4、消毒 在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境原因: 5、pH、温度、光照 菊花: pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h 植物组织培养用的培养基,含有植物生长发育所需要的各种营养物质,这些营养物质同样为细菌等微小的生物提供了适合的营养。在这种培养基上,细菌等微小的生物比植物细胞具有更强的新陈代谢能力,它们比植物细胞生长、繁殖得更快,而且它们会产生毒素,使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此,植物组织培养要想取得成功,必须有效地防止细菌等的污染,保证培养材料、培养基、培养用具完全无菌。为了达到这一要求,就要在植物组织培养过程中进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作。 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培 四、实验操作 思考:高等植物是光能自养型生物,为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基? 答案:此时的组织或细胞为离体的,即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境,而不是能体现其整个植物体的光能自养 冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上 思考:培养过程中为什么需要进行光照? 答案:在培养过程中,是脱分化、再分化的过程,随着芽和根的形成,就具有了自养的能力,是由细胞到一个个体的演变过程 思考:在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的? 1、培养基的灭菌;(高压蒸汽灭菌) 2、外植体的消毒;(酒精、氯化汞) 3、接种的无菌操作;(酒精、酒精灯——灼烧) 4、无菌箱中的培养; 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 21.下图是植物组织培养的简略表示。据此回答: ① ② ③ 练习1、下图是植物组织培养的简略表示。据此回答: (1)①表示__________________,它能被培养成为④的根本原因是_________________ _____________________。 (2)②表示____________,它与①相比分化程度____________,全能性____________。 (3)若想制成人工种子,应选用____________。 (4)若①是花药,则④是____________,继续对其使用____________处理可获得____________正常植株,该过程称为____________。 (5)若①是胡萝卜根尖细胞,则培养成④的叶片的颜色为____________,这说明____________。 (6)若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物——紫草素,培养将进行到____________。 ④ ① 脱分化 ② 再分化 ③ 答案: (1)离体的植物组织或器官 植物细胞具有全能性 (2)愈伤组织 低 高 (3)③ (4)单倍体植株 秋水仙素

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