自噬双标腺病毒(mRFP-GFP-LC3)使用指南1404.docVIP

自噬双标腺病毒（mRFP-GFP-LC3）使用指南 背景： 自噬是细胞内的一种“自食（Self-eating）”的现象，凋亡是“自杀（Self-killing）”的现象，二者共用相同的刺激因素和调节蛋白，但是诱发阈值和门槛不同，如何转换和协调目前还不清楚. 自噬是指膜（目前来源还有争议，大部分表现为双层膜，有时多层或单层）包裹部分胞质和细胞内需降解的细胞器、蛋白质等形成自噬体，最后与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物，以实现细胞稳态和细胞器的更新mRFP-GFP-LC3腺病毒的操作 收到病毒后的处理 （一）、腺病毒的储存 1、病毒采用运输收到病毒液后若用于实验，可分装部分于4保存（一周内用完）避免反复冻融，否则会降低病毒滴度每次冻融会降低病毒滴度10%。建议不要在-20下长期保存。如果病毒储存时间超过6个月，应该重新病毒滴度。 （二）、腺病毒的稀释 需要稀释病毒时，将病毒取出后置于冰上融解，使用培养目的细胞用PBS或培养基稀释到所需浓度后混匀分装后4保存，并尽快用于实验（一周内用完），动物实验建议使用注射用平衡液来稀释，并尽快用完。 培养皿 表面积 对应细胞培养液体积 病毒感染对应细胞培养液体积 类型 /cm2 96-well 0.3cm2 100ul 50ul 24-well 2cm2 500ul 250ul 12-well 4cm2 1