第九章核酸代谢技术总结.ppt

四、基因工程简介P325 1.概念 亦称遗传工程，即利用DNA重组技术的方法，把DNA作为组件，在细胞外将一种外源DNA(目的基因)和载体DNA重新组合连接(重组)，最后将重组体转入宿主细胞，使外源基因DNA在宿主细胞中，随细胞的繁殖而增殖(cloning，克隆)，或最后得到表达，最终获得基因表达产物或改变生物原有的遗传性状。 2.基因工程的操作技术 (1)体外基因重组 目的基因的制备 PCR 载体的构建：质粒或噬菌体 目的基因与载体重组 (2)重组体DNA的转化增殖和表达 转化 筛选 增殖和基因表达 Foreign DNA to be inserted Plansmid vector Joining Recombinant DNA molecule Introduction into host cells by transformation of viral infection Host chromateme Slection for cells coteining a recombinant DNA molecule Cloning + 3.应用与前景 聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction, PCR) PCR：在体外中通过酶促反应有选择地大量扩增（包括分离）一段目的基因的技术。 原理：以待扩增的两条D