水溶性量子点合成及其生物毒性检测.docx

水溶性量子点的合成表征及生物毒性测定王佳琪舒凡刘林章晓雯齐悦柳慧颖（武汉大学化学与分子科学学院湖北武汉430072）摘要：以Cd(CH3COO)2·2H2O、K2TeO3 为原料，在NaBH4为还原剂和巯基乙酸(TGA)为配体的条件下，以一步水相法合成CdTe量子点。通过紫外-可见光谱和荧光光谱表征不同反应时间得到的量子点，并计算其粒径、浓度和荧光量子产率，并将不同浓度的CdTe量子点与酵母细胞混合培养，用Biomass法测定CdTe量子点的生物毒性。关键字：量子点荧光量子产率生物毒性中图分类号：O 643文献标识码：A0引言纳米材料由于其特有的光学、电学以及磁学性能在化学、物理、生物、医学以及材料科学等领域得到了广泛的应用。纳米荧光量子点由于其荧光量子产率高、发射光谱可调、激发光谱宽和发射光谱窄等独特的光学性能被广泛用于生物医学成像以及生物检测等领域。随着纳米材料在生物医学领域的应用越来越广泛，纳米材料的生物学效应也引起人们的广泛关注。量子点是准零维的纳米材料，由少量的原子所构成。粗略地说，量子点三个维度的尺寸都在100 nm以下，外观恰似一极小的点状物，其内部电子在各方向上的运动都受到局限，所以量子局限效应特别显著。半导体量子点又称为半导体纳米晶或半导体纳米粒子是一种由II-Vl族（CdSe，CdTe，CdS，ZnTe，ZnO）或III-V族（InAs，GaSb）和IV族（Si，Ge）元素组成的纳米颗粒，尺寸小于或者接近激子波尔半径（一般直径不超过10 nm），具有明显的量子效应。本实验旨在以水溶性量子点为例，通过检测量子点对细胞生物活性的影响，考察纳米材料的生物学效应，同时为检验其他纳米材料以及化学物质的生物学效应提供一个普适性的方法。实验所用CdTe量子点通过一步水相法合成，其中Cd(CH3COO)2?2H2O作为Cd源，K2TeO3作为Te源，NaBH4作为还原剂，巯基乙酸作为配体，涉及的主要化学反应为：2TeO32- + 3BH4- + 6OH- = 2Te2- + 3BO33- + 9H2OCd2+ + Te2- = CdTeK2TeO3经NaBH4还原后与Cd2+结合生成CdTe，在巯基乙酸的保护下，通过控制反应时间可以得到不同粒径的CdTe晶体。CdTe晶体的荧光光谱可以通过荧光光谱仪测得，其浓度可以通过紫外吸收光谱结合摩尔消光系数进行计算。本实验采用biomass法，检测纳米材料主要是CdTe量子点对酵母细胞存活和生长的影响。酵母菌的死细胞和活细胞在630nm处的吸光度有所差异，通常一定体积溶液内的生物量（活细胞数量）与吸光度成正相关性，因此可以比较在630nm处的吸光度考察CdTe量子点对酵母细胞生物活性影响的浓度依赖性。将不同浓度的CdTe量子点与酵母细胞混合培养，测定不同培养条件下培养不同时间的酵母细胞在630nm处的吸光度，绘制吸光度曲线，记录不同浓度下酵母细胞的生长情况。1实验部分1.1试剂与仪器1.1.1 试剂氢氧化钠，Cd(CH3COO)2·2H2O，巯基乙酸(TGA)，NaBH4，K2TeO3，酵母细胞。所用试剂均为分析纯，实验用水为超纯水。1.1.2仪器KQ2200型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），VORTEX-5振荡仪（海门市其林贝尔仪器制造有限公司），LX-300型迷你离心机（海门市其林贝尔仪器制造有限公司），Maxait恒温摇床（太仓市实验设备厂），TG16-WS台式高速离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司），新苗净化工作台（上海新苗医疗器械制造有限公司），UV-3100紫外-可见光谱仪，RF-5301PC荧光光谱仪。1.2 实验步骤1.2.1 CdTe水溶性量子点的制备[1]在100 mL三口圆底烧瓶中加入25 mL的超纯水，然后加入0.05mmol Cd(CH3COO)2·2H2O (13.3mg)搅拌均匀后加入4μL的TGA，用1 mol/L的NaOH溶液调节体系的pH至10.5，搅拌5min以上。在100 mL的圆底烧瓶中加入0.01mmol的K2TeO3 (2.5mg)溶解于25mL超纯水中，用磁子搅拌直至其完全溶解。将上述的两种溶液混合并加入20 mg的NaBH4，继续搅拌5min。之后，控制体系的反应温度为100°C，反应回流4 h。分别在反应时间为0min、15min、30min、1h、2h、3h及4h时收集1 mL反应溶液。1.2.2 CdTe量子点的紫外-可见光谱表征用紫外-可见分光光度计测得反应时间控制在0min、15min、30min、1h、2h、3h及4h的CdTe量子点的紫外-可见吸收光谱，以超纯水作为参比，光谱扫描范围400-700nm，从而测得CdTe量子点的量子限域峰(λ)。1.2.3 CdTe量子点的荧光光谱表征利用荧光光谱仪表征上述