第五章 凝集反应.ppt

第一节 凝集反应的特点 第二节 直接凝集反应 第三节 间接凝集反应 第四节 自身红细胞凝集试验 抗球蛋白试验又称 Coombs试验 第五节 抗球蛋白试验 * 第五章 凝集反应 第一节 凝集反应的特点 第二节 直接凝集反应 第三节 间接凝集反应 一、间接凝集反应的类型 二、间接血凝试验 三、胶乳凝集试验 四、明胶凝集试验 五、间接凝集反应的应用 第四节 自身红细胞凝集试验 第五节 抗球蛋白试验 思考题 小结 凝集反应定义 细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体（或抗原）发生特异性反应，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。 反应阶段： 抗原抗体的特异性结合 出现肉眼可见的凝集现象 反应特点： IgM的作用比IgG大数百倍 IgG与抗原结合后，常不出现凝集反应，称不完全抗体 凝集反应 可见反应形成 直接凝集反应(direct agglutination)： 颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。 （一）玻片凝集试验 + ? 方法评价: 定性试验 简便和快速 敏感度低 临床应用: 菌种鉴定 血清学分型 血型鉴定 在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。 （二）试管凝集试验 试管凝集试验 试管凝集试验 方法评价： 半定量试验 简便、快速 敏感度低 可有假阳性 临床应用： Widal reaction Weil-felix reaction Wright test:布鲁菌病 交叉配血试验 间接凝集反应(indirect agglutination): 将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象 载体种类： RBC（醛化） 聚苯乙烯胶乳颗粒（羧化） 正向间接凝集试验 反向间接凝集试验 间接凝集抑制试验 协同凝集试验 一、间接凝集反应的类型 用抗原致敏载体--检测抗体 正向间接凝集试验 反向间接凝集试验 用抗体致敏载体----检测抗原 间接凝集抑制试验 用抗原致敏载体--检测抗原 SPA:SPA-IgG Fc; SPA抗体致敏------测抗原 协同凝集试验 二、间接血凝试验 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024 Pos. Neg. Titer 64 8 512 2 32 128 32 4 Patient 1 2 3 4 5 6 7 8 反向间接血凝试验 血凝试验强度 三、胶乳凝集试验 四、明胶凝集试验 将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红色明胶颗粒上，当致敏颗粒与样品血清作用时，若血清含有抗病毒抗体则可形成肉眼可见的粉红色凝集 五、间接凝集反应的应用 抗原的检测 反向间接凝集试验可用于检测病原体的可溶性抗原，也可用于检测各种蛋白质成分。 抗体的检测 　　检测细菌、病毒、寄生虫等感染后产生的抗体。 未经致敏的受检者新鲜红细胞 试剂：抗人O型红细胞的单克隆抗体 临床应用：HIV检测、HBV检测 自身红细胞凝集试验