同种异体骨髓间充质干细胞在比格犬体内异位构建组织工程骨.doc

同种异体骨髓间充质干细胞在比格犬体内异位构建组织工程骨 武京国1，马 燕2，曹霏霏2，王德峰1，张庆富1，张喜善1，李 勇2(1泰山医学院附属医院骨科，山东省泰安市 271000；2泰安市中心医院分院，山东省泰安市 271000) 引用本文：武京国，马燕，曹霏霏，王德峰，张庆富，张喜善，李勇. 同种异体骨髓间充质干细胞在比格犬体内异位构建组织工程骨[J].中国组织工程研究，2016，20(46):6845-6853. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.46.001 ORCID: 0000-0002-6406-5765(武京国) 文章快速阅读： 文题释义： 同种异体移植：是指同种不同基因型个体之间的移植，是临床最常见的移植类型，也是移植免疫学研究的重点所在。 ：又称磷酸钙。化学式Ca3(PO4)2。白色晶体或无定形粉末。存在多种晶型转变，主要分为低温β相(β-TCP)和高温α相(α-TCP)，相转变温度为1 1201 170 ℃，熔点1 670 ℃；溶于酸，不溶于水和乙醇。在人的骨骼中普遍存在，是一种良好的骨修复材料。 间充质干细胞，MTT法检测标记细胞的体外增殖能力。将自体或异体骨髓间充质干细胞分别接种珊瑚、β磷酸三钙支架体外成骨诱导7d后，植入比格犬背部皮下，空白支架作为阴性对照。术后3 d及1，2，4，8，12周取材，苏木精伊红染色观察成骨情况，应用ipp软件统计分析成骨面积。PT-PCR和ELISA法检测组织工程骨成骨过程中相关基因的表达。CM-Dil组冰冻切片荧光显微镜下示踪骨髓间充质干细胞在体内的转归。 结果与结论：①48周时异体组织工程骨的成骨面积小于自体组织工程骨，但到12周后2组无明显差异；②4周自体组织工程骨表达骨 γ 羧基谷氨酸蛋白高于异体组织工程骨，提示后者先于前者进入骨矿化期；③ELISA检测发现自体组织工程骨的碱性磷酸酶和骨钙素表达量在4周左右高于异体组织工程骨，到12周后趋于一致；④通过CM-Dil标记骨髓间充质干细胞发现同种异体骨髓间充质干细胞的数量相比自体骨髓间充质干细胞有明显的减少⑤结果说明，同种异体组织工程骨在大动物体内能够异位成骨(12周)，但早期(8周前)成骨效率低于自体组织工程骨，这种差别可能与骨髓间充质干细胞同种异体移植后发生免疫反应导致细胞数量减少有关。 using allogenic bone marrow mesenchymal stem cells in beagle dogs Wu Jing-guo1, Ma Yan2, Cao Fei-fei2, Wang De-feng1, Zang Qing-fu1, Zhang Xi-shan1, Li Yong2 (1Department of Orthopaedics, Affiliated Hospital of Taishan Medical University, Taian 271000, Shandong Province, China; 2Branch of Taian City Central Hospital, Taian 271000, Shandong Province, China) Abstract BACKGROUND: Allogenic bone marrow mesenchymal stem cells as seed cells for tissue engineering have become the future trend of development. OBJECTIVE: To investigate the osteogenic effects of allogenic bone marrow mesenchymal stem cells and the outcome in vivo. METHODS: Bone marrow mesenchymal stem cells from beagle dogs were marked with chloromethylbenzoyl ammonia fluorescent dye (CM-Dil), and the proliferation of labeled cells was measured using MTT assay in vitro. Autologous or allogenic bone marrow mesenchymal stem cells were inoculated into coral and β-tricalcium phosphate scaff