1.2 基因工程的基本操作程序教案2（人教版选修三）.docVIP

教学过程 教学内容 教学手段和方法 预期目标 1、复习“基因工程”的概念：“基因工程是指按照人们的意愿进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品”引入新课教学。 2、目的基因获取 ⑴从基因文库中获取目的基因 ⑵利用PCR技术扩增目的基因 ⑶直接人工合成 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 ⑴将目的基因导入植物细胞 ⑵将目的基因导入动物细胞 ⑶将目的基因导入微生物细胞 4、目的基因的检测和鉴定 ⑴检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因。 ⑵检测目的基因是否转录出了mRNA ⑶检测目的基因是否翻译成蛋白质。 ⑷个体生物学水平的鉴定。 5、尝试设计某一转基因生物的研制过程。 师：通过分析图1-6我们知道基因工程的基本操作程序包括目的基因获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体、目的基因检测与鉴定。 师：基因工程概念中的“更符合人们需要”的那个基因就是目的基因了，只有有了目的基因，我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性，所以基因工程的基本操作的第一个环节就是目的基因的获取。到底什么是目的基因呢？ 师：目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因，如抗虫基因，抗旱基因。 师：怎样才能获得这些目的基因呢？获取目的基因的方法有哪些呢？ 学生阅读书本讨论，师生归纳：（一）可从基因文库中获取目的基因。 师：通过讨论分析我们已知什么是基因文库了，那么基因文库和基因组文库有什么区别呢？可结合P10生物技术资料卡讨论分析。 生：若一个基因文库中包含了一种生物所有的基因，那么这种基因文库就叫做基因组文库，若只包含了一种生物的一部分基因就叫做部分基因文库。 师：怎样从基因文库中得到我们所要的目的基因呢？ 师、生：可根据目的基因的有关信息来获取目的基因，如根据基因的核苷酸序列，基因在染色体上的位置等特性来获取目的基因。 师：除了从基因文库中获取目的基因，还可以利用PCR技术扩增目的基因。 师：PCR是聚合酶链式反应的缩写，是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 师：同学们要认真观察多媒体演示过程并结合书本，学会描述扩增的过程以及PCR的原理。 生：目的基因DNA受热（加热至90—950C）变性后解链为单链，然后在DNA聚合酶作用下延伸，如此重复循环。 师：PCR的原理是什么呢？ 生：利用DNA双链复制的原理，将基因的核苷酸序列不断加以复制，使其数量呈指数方式增长。 师： PCR扩增过程所需前提的条件是什么？（教学过程中可先引导学生复习DNA复制的过程） 生归纳：需要引物和已知的一段目的基因的核苷酸序列。 师生共同归纳：PCR技术扩增目的基因过程： 目的基因DNA加热至90—950C变性形成单链DNA——温度降低至55—600C引物与互补DNA链结合——适当升温至70—750C，在DNA聚合酶作用下从引物起始进行互补链的合成。 若基因比较小，核苷酸序列又已知，可通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。 师：作为基因工程表达载体，只需含目的基因就可以完成任务吗？为什么要有“表达载体”的构建这一步骤？ 生：可使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。 师：一个基因表达载体有哪些结构组成的呢？ 师生共同归纳：基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子以及标记基因等。 师：什么是启动子、终止子？它们的作用是什么呢？ 生：启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因，转录出mRNA最终获得所需要的蛋白质。终止子也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。 师：标记基因的作用是什么呢？ 生：鉴别受体细胞中是否含有目的基因从而把含目的基因细胞筛选出来。 师：基因表达载体构建完成后，如何将目的基因导入受体细胞呢？ 师：根据受体细胞的不同，导入的方法也有所不同，将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法。下面以农杆菌转化法为例。 师：农杆菌有什么样的特点，使其可以帮助目的基因进入受体细胞的呢？ 生讨论归纳：农杆菌能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，当植物受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌移向细胞。这时农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体的DNA上