选修1生物技术实践复习要点概要.ppt

称量 灭菌 倒平板 平板划线 稀释涂布平板 微生物两种分离方法比较 5、接种 ①接种过程：洗净双手→___________→接种→贴标签。 ②接种工具：包括________、涂布器。 ③接种方法：平板划线法、________________法。 ④注意事项：整个操作过程都要在____________旁完成。 (3)培养：接种后的培养皿放入________内培养。 6、菌种保藏 (1)临时保藏 ①操作： 采用____________培养基，菌落长成后，放入_______冰箱中保藏，以后每3～6个月，转移一次至新的培养基。 ②缺点：保存时间________，菌种易被________或产生变异。 (2)长期保存法：__________法，放在－20 ℃下保存。 点燃酒精灯 接种环 稀释涂布平板 酒精灯火焰 恒温箱 固体斜面 4 ℃ 不长 污染 甘油管藏 6、微生物纯化的三种途径 (1)单菌落挑取法： 利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基表面，直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物。 (2)选择培养法： 利用选择培养基对微生物进行选择培养，直接获得目的微生物。 (3)鉴定培养法： 利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现特有的特征，然后筛选目的微生物。 1、平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同 (1)第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。 (2)每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。 (3)划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 2、“选择菌落数在30～300的平板”的两个提醒 　　用稀释涂布平板法计数微生物时，要求选择菌落数在30～300的平板进行计数。解题时易出现以下误解： (1)只得到1个菌落数在30～300的平板是错误的。错误的原因是不符合实验的重复原则，易受到偶发因素的影响。 特别提醒 (2)得到3个或3个以上菌落数在30～300的平板，也不一定正确，这可能有两种情况： ①不同平板间差异较大，如得到3个平板，菌落数分别为230、34、240，虽然菌落数均在“30～300”之间，这也是不正确的，因为“34”与“230”“240”差异太大，应重新实验找出原因。 ②不同平板之间差异不大，是符合要求的，用其平均值作为估算的最终结果。 可见，并不是只要得到3个“菌落数在30～300的平板”即可，而应该是涂布的同一稀释度的平板均符合“菌落数在30～300的平板”且无较大差异，说明实验操作合格，才能按照计算公式进行计算。 3、微生物接种技术的核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。平板划线法接种是通过连续划线将微生物稀释分散到培养基的表面，以获得单细胞菌落。 4、为防止外来微生物入侵，通常对实验操作空间、操作者的衣着和手进行消毒，而对培养器皿、接种用具、培养基等进行灭菌。对培养基通常选择高压蒸汽灭菌法进行灭菌。 5、在微生物的培养过程中，常用来分离微生物的方法是稀释涂布平板法或平板划线法。 6、为了使微生物在培养基上能够均匀分布，一般用涂布法将微生物接种在培养基上。 7、在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌生长；透明圈的大小表示此种抗生素抗菌能力的强弱 (2012·新课标全国卷)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题： (1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于________培养基。 (2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即______ __和____ ____。 (3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。 (4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_____ _和___ ____。无菌技术要求实验操作应在酒精灯__ _____附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。 解析：(1)从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株，使用的培养基应是以原油为唯一碳源的选择培养基，通过控制碳源这种营养成分，来促进能高效降解原油的菌株的生长，抑制其他微生物的生长。(2)菌种纯化培养时，常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。(3)当固体培养基上长出单菌落后，可通过比较菌落周围分解圈的大小，来判断菌株降解原油能力的大小。一般来说，分解圈越大说明该菌株的降解能力越强，反之则越弱。(4)实验室培养微生物的过程中，常用灼烧灭菌法对接