食品安全部产品.docVIP

美国柏尔生物科技有限公司 (BIOO Scientific Corp.) MaxSignalTM 组胺酶法测定试剂盒 使用说明书(M1032-04) 一. 简介 1．试剂盒描述 MaxSignalTM酶盒是用于等中的检测60ppm。与传统的C-MS方法相比，酶法有操作简便、、低成本的优点。MaxSignalTM 组胺酶盒为养殖者和政府监督管理部门提供了更准确快速检测残留的方法，这包括： 高灵敏度低检测下限（/海鲜 6ppm）。 。 高重复性。 2．试剂盒原理 MaxSignaLTM酶盒。 3.试剂盒组成部分和储存 （1）试剂盒包括： 规格 保存条件 微孔板 96孔板（12×8 孔 室温 组胺标准品： 阴性质控 1.0ppm 2.0ppm 4.0ppm 8.0ppm 12.0ppm 1000ppm（加标） 0.8mL 0.8mL 0.8mL 0.8mL 0.8mL 0.8mL -20℃ 25×样品提取液 2×25mL -20℃ 20×富集溶液 2×25mL -20℃ 标准混合物（Master Mix） 6mL -20℃ 酶混合物（Enzyme Mix） 6 mL -20℃ （）样品检测下限 检测下限（ppm） 肉样/海鲜 6 鱼粉 10 牛奶 40 葡萄酒 40 （）交叉反应数据 交叉反应(%) 100 4．其他需要而本试剂盒未提的设备或材料 酶标仪 甲醇 二.警告 实验前请阅读以下文字，以保证获得最佳实验效果。 不要使用过期的试剂盒。 不同批次的试剂盒不要混用，抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。 尽量保持室温20-25℃，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。同样的，不要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫若干纸巾或者其他物料。 水质量很重要，确保使用蒸馏或者去离子水。 加入样品或者试剂到空的微孔板时，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接触。 孵育时间的计算越规范越好，保持添加标准品的一致性，先添加标准品后添加样品。 从低浓度到高浓度地添加标准品，降低影响标准品曲线质量的风险。 将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中，冷藏保存。 三. MaxSignalTM Histamine Enzymatic Assay Kit检测方法1．试剂的准备 所有的试剂在使用之前应将其回温至室温，并在使用试剂前摇动几下，以保证合理的浓度。（）67% 100%的甲醇到67% （2）1×富集溶液 用蒸馏水按1：的比例来。按：的比例来。按：的比例来。2．样品的准备2.1肉样/海鲜 2.1.1 方法I 匀质样品，取2g匀质后的样品，加入4mL甲醇溶液，漩涡振荡2分钟； ℃孵育5分钟，漩涡振荡5； 4000g（6000rpm）离心5分钟。移取0.5mL上清液到另一试管（避免触及任何沉淀物或者悬浮固体）； 加入同等体积的1×样品提取液； 取100μL进行检验。 稀释倍数：.0。可同时做一份空白对照，以消除背景值的影响。 2.1.2 方法II 匀质样品，取2g匀质后的样品，加入8mL1×富集溶液，漩涡振荡2分钟； ℃孵育10分钟，漩涡振荡5； 14000g（13000rpm）离心5分钟。移取0.5mL上清液到另一试管（避免触及任何沉淀物或者悬浮固体）； 加入0.1mL的6×样品提取液； 取100μL进行检验。 稀释倍数：.0。可同时做一份空白对照，以消除背景值的影响。 2.2鱼粉 匀质样品，取0.5g匀质后的样品，加入2.5mL1×样品提取液，漩涡振荡2分钟； ℃孵育5分钟，漩涡振荡30秒； 4000g（6000rpm）离心5分钟，移取0.4mL上清液到另一试管（避免触及任何沉淀物或者悬浮固体）。加入相同体积（0.4mL）的甲醇； 75℃孵育5分钟； 4000g（6000rpm）离心5分钟，移取0.4mL上清液到另一试管 稀释倍数：10 2.3牛奶 4000g（6000rpm）离心5分钟； 移取已知体积的下层液到另一试管，避免触及上部脂肪层； 用1×样品提取液按1：40的比例稀释样品。 稀释倍数：2.4葡萄酒 用1×样品提取液按1：40的比例稀释样品 稀释倍数： 3．酶测试步骤 5℃），反复倒置管子3次以混合均匀。用一个干净的管子，混合“标准混合物和酶混合物”（1：1，V：V）。按照以下说明确定混合的体积量。 反应混合物 每个反应需要体积 24次反应 标准混合物 （Master Mix） 酶混合物 （Enzyme Mix） 100μL 2.4mL 1.2mL 1.2mL 3.2 准备工作标准品 将6管含有组胺的标准品回温（20-25℃）。 3.3 检测步骤 加入(L标准品于所设定的孔中加入(L67%