动物细胞工程课件资料.ppt

专题2.2 动物细胞工程 第一课时 动物细胞培养 学习目标： 1.简述动物细胞培养的过程、条件及应用 2.说出动物细胞培养和植物组织培养的区别。 序号 展示内容 展示组 点评 1 动物细胞工程常用的技术手段有哪些？基础是什么？ 2 什么是动物细胞培养、其原理是什么？ 3 用文字和箭头画出动物细胞培养过程流程图 4 解释名词细胞贴壁、接触抑制、原代培养、传代培养 5 动物细胞培养需要什么条件？ 6 动物细胞培养技术的应用有哪些？ G5 G6 G4 G3 G2 G1 G1 G2 G3 G4 G5 G6 未展示学生探究讨论下列问题： 1.动物细胞培养过程中取什么样的材料好？幼龄与老龄动物的组织细胞比较，分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较，哪一种更易于培养？ 2.进行动物细胞培养过程中用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 3.为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？ 4.动物细胞培养技术能体现细胞全能性吗？动物细胞培养会出现脱分化吗？ 未展示学生探究讨论下列问题： 1.基因工程的基本操作程序？核心？ 2.基因工程的基本工具？ 3.植物细胞工程的基本技术有哪些？原理分别是？ 一、动物细胞培养 1、概念： 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖. 怎样进行动物细胞培养？ 该技术实施的原理是什么？ 细胞增殖原理 一、动物细胞培养 2、过程： 阅读课本P44-45 取动物组织块 剪碎组织 用胰蛋白酶处理分散成单个细胞 转入培养液，制成细胞悬液进行原代培养 贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬液 转入培养液中进行传代培养 放入二氧化碳培养箱中培养 探究1：取什么样的材料好？幼龄与老龄动物的组织细胞比较，分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较，哪一种更易于培养？ 为什么动物细胞要分散成单个细胞培养? 探究2：用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 探究2.进行动物细胞培养过程中用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 说明细胞间的物质主要是蛋白质； 用胃蛋白酶不行，因为多数动物细胞培养的适宜pH为7.2-7.4，此pH下胃蛋白酶变性失活。 一、动物细胞培养 2、过程： 阅读课本P44-45 取动物组织块 剪碎组织 用胰蛋白酶处理分散成单个细胞 转入培养液，制成细胞悬液进行原代培养 贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬液 转入培养液中进行传代培养 放入二氧化碳培养箱中培养 什么叫原代培养？ 什么是传代培养？ 动物细胞培养中会出现什么特点？ 目前使用或冷冻保存的是什么细胞？ 原因？ 动物胚胎或幼龄动物器官组织 剪碎 胰蛋白酶 细胞悬液 10代细胞 原代培养 50代细胞 贴壁生长 接触抑制 传代培养 无限传代 细胞株 细胞系 培养液 适宜环境 对于目前使用或冷冻保存的细胞有什么要求？ 遗传物质未改变 遗传物质已改变 目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内,以保持细胞正常的二倍体核型. 二倍体核型:二倍体生物体细胞染色体组在有丝分裂中期的表现,是染色体数目、大小、形态特征的总和。 一、动物细胞培养 3、条件： （1）无菌无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液） （2）营养（糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、 微量元素、血清等） （3）温度和PH（温度为36.5±0.5℃, PH为7.2－ 7.4） （4）气体环境（O2和CO2， O2是细胞代谢所必需 的， CO2的主要作用是维持培养液的PH） 探究3：为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？ 血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成（称为必需氨基酸），必须由培养液提供。血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子（如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子等）；血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此，细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加10%～20%的血清。 加血清的目的：可补充合成培养基中缺乏的物质 4、动物细胞培养技术的应用： 大规模的生产有重要价值的生物制品 为基因工程提供受体细胞 检测有毒物质，判断毒性 用于生理、病理、药理等方面的研究 植物组织培养和动物细胞培养的比较 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 培养目的 克隆水平 细胞的全能性 细胞增殖 固体培养基 液体培养基