六味顺激胶囊对肝郁脾虚型肠易激综合征模型大鼠内脏敏感性及五羟色胺水平的影响.docVIP

六味顺激胶囊对肝郁脾虚型肠易激综合征模型大鼠内脏敏感性及五羟色胺水平的影响 　　摘要：目的 观察六味顺激胶囊对肝郁脾虚型肠易激综合征（IBS）大鼠的生存状态、内脏敏感性、五羟色胺（5-HT）水平的影响，探讨其作用机制。方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组和六味顺激胶囊高、中、低剂量组，采用番泻叶结合束缚的方法复制肝郁脾虚型IBS大鼠模型，造模后第2日，各给药组给予相应药物，每日1次，连续2周。观察肝郁脾虚型IBS大鼠生存状态、内脏敏感性，测定血清及下丘脑5-HT含量。结果 与模型组比较，六味顺激胶囊高、中、低剂量组大鼠体质量增加（P0.05），泄泻、神态倦怠、皮毛散乱、脾气暴躁、易怒等症状改善，内脏敏感性显著降低（P0.01），血清及下丘脑5-HT含量显著降低（P0.01）。结论 六味顺激胶囊能显著改善肝郁脾虚型IBS模型大鼠的生存状态及肠道功能紊乱状态，其可通过调节大鼠5-HT水平发挥治疗作用。 　　关键词：六味顺激胶囊；肠易激综合征；内脏敏感性；五羟色胺；大鼠 　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.08.013 　　中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2014）08-0046-03 　　肠易激综合征（irritable bowel syndrome，IBS）属于胃肠功能紊乱性疾病，其发病机制至今尚未明了，在治疗上还没有理想的方法，现多处于对症治疗阶段。目前已知的相关机制包括胃肠道动力和肠平滑肌功能障碍、应激、胃肠激素分泌异常、脑-肠轴学说等[1]。六味顺激胶囊（原名康泰胶囊）是广州中医药大学脾胃研究所周福生教授治疗IBS的经验方，具有疏肝健脾、理气止痛的作用。本研究采用番泻叶灌胃加束缚法复制肝郁脾虚型IBS大鼠模型，观察六味顺激胶囊对IBS大鼠生存状态、内脏敏感性、血清和下丘脑五羟色胺（5-HT）水平的影响，探讨其作用机制。 　　1 实验材料 　　1.1 动物 　　SPF级SD大鼠60只，雌雄各半，体质量180～220 g，广州中医药大学动物实验中心提供，合格证号：SCXK（粤）2013-0020。 　　1.2 药物 　　六味顺激胶囊，0.37 g药粉/粒，4.1 g原药材/g药粉，广州松山湖臻德生物医药科技有限公司提供，批匹维溴铵片（得舒特），法国苏威制药生产，批号627944；番泻叶，购于广东省中医院，康美药业股份有限公司生产，批 　　1.3 主要试剂与仪器 　　5-HT酶联免疫吸附试剂盒，Bule Gene，批水合氯醛，天津市科密欧化学试剂有限公司，批FSH-2A高速匀浆机，昆山隆源化工有限公司；RT-2100C酶标仪，深圳雷杜公司；CT14RD型离心机，上海天美科仪器有限公司。 　　2 实验方法 　　2.1 番泻叶水煎剂的制备 　　称取100 g番泻叶药材粗粉，加入8倍量的水，煎煮30 min，过滤，减压浓缩，使药液浓度以原药材计含番泻叶0.4 g/mL。 　　2.2 分组、造模与给药 　　将SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组（20 mg/kg）和六味顺激胶囊高（6.06 g/kg）、中（3.03 g/kg）、低（1.52 g/kg）剂量组，每组10只。除正常组外，其余各组大鼠制备肝郁脾虚型IBS大鼠模型[2]：分别灌胃0.4 g/mL番泻叶煎剂，给药体积10 mL/kg；灌胃1 h，用宽透明胶带束缚其肩部、前肢及胸部，限制大鼠用前肢搔抓头面部，但不限制其活动，束缚时间为1 h。连续2周。造模完成后，阳性药组给予匹维溴铵溶液灌胃，六味顺激胶囊高、中、低剂量组分别给予不同剂量的六味顺激胶囊溶液灌胃，给药体积为10 mL/kg，正常组和模型组给予等量生理盐水。每日1次，连续2周。 　　2.3 指标评价 　　2.3.1 一般情况观察 实验期间观察各组大鼠行为学、大便性状、精神状态、体质量等变化。 　　2.3.2 内脏敏感性评估 利用大鼠腹部回缩反射 （AWR）测定方法[3]，将血压计、针管与自制指套气囊用三通管连接，用针管向气囊内打气时可以在血压计上读出气囊内压力。大鼠乙醚麻醉，将石蜡油润滑后的气囊经肛门插入约5 cm，用胶布把导管和大鼠尾巴根部缠在一起，固定气囊。大鼠苏醒后，将其放在特制的透明塑料笼内，大鼠在此笼内不能转身。待大鼠适应环境15 min，逐渐打气扩张肠道，分别观察引起大鼠腹部抬起以及背部拱起的压力阈值，每一阈值重复测定3次，数据取均值。 　　2.3.3 血清及下丘脑五羟色胺水平检测 内脏敏感性评估后，将大鼠用10%水合氯醛麻醉（麻醉剂量0.35 mL/100 g），剖腹，腹主动脉采血，4 ℃、