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散血草水提物抗胃溃疡的实验研究.doc
散血草水提物抗胃溃疡的实验研究
摘要:目的 观察散血草水提物对胃溃疡小鼠的影响,为临床应用提供实验依据。方法 采用利血平诱导制作胃溃疡动物模型。实验小鼠随机分为正常组、模型组、散血草低剂量组、散血草高剂量组、雷尼替丁组,各给药组给予相应药物灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水,连续4周。测定胃溃疡面积、胃液量和胃液酸度,酶联免疫法检测血清中相关因子水平,RT-PCR法检测胃组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶-2(COX-2)基因表达。结果 与模型组比较,散血草低、高剂量组胃溃疡面积明显减少,血清中生长抑素和血管活性肠肽水平升高,胃动素和P物质水平降低(P0.05,P0.01);散血草低、高剂量组白细胞介素(IL)-6、IL-12、肿瘤坏死因子-α、γ-干扰素水平及iNOS、COX-2基因表达水平降低(P0.05,P0.01)。结论 散血草具有较好的抗胃溃疡作用,散血草高剂量组表现更优。
关键词:散血草水提物;胃溃疡;细胞因子;基因表达;小鼠
DOI:10.3969/j.issn.1005-5304.2014.08.018
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2014)08-0063-04
散血草Ajuga decumbens Thunb.是唇形科筋骨草属植物,主要分布在浙江、四川、重庆、江苏和福建等省[1]。《中药大辞典》对其形态的记载为“多年生草
53(3):1397-1410.
[9] 王念鸿,郭晓蕙.SOCS-3与胰岛素抵抗[J].国外医学:内分泌学分册, 2005,25(6):409-411.
[10] 林娜,姚晓光,李南方.细胞因子信号传导抑制因子3的研究进展[J].中国医学科学院学报,2012,34(2):178-182.
[11] Nakanishi T, Li R, Liu Z, et al. Sexual dimorphism in relationship of serum leptin and relative weight for the standard in normal-weight, but not in overweight, children as well as adolescents[J]. Eur J Clin Nutr,2001,55(11):989-993.
(收稿日期:2013-11-29;编辑:华强)
本,高10~30 cm,茎基部倾斜或匍匐,上部笔直,多分支,四棱形,略带紫色,全株密被白色柔毛”[2]。散血草味苦、性寒,归肺、肝经,清热解毒、凉血消肿,止血、止痛作用较好[3]。现代药理研究表明,散血草具有抑菌、调节免疫功能、抗纤维化、抗肿瘤等功效[4-5]。本研究采用利血平诱导小鼠胃溃疡模型,观察散血草对胃溃疡小鼠的影响,为临床应用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 药物
散血草,购自于重庆和平药房连锁有限责任公司,重庆市食品药品检验所毛庆高级工程师鉴定为正品;雷尼替丁,韩国Sam Chun Dang制药株氏会社,批号12003;利血平,美国Sigma公司。
1.2 动物
SPF级昆明小鼠50只,购自于重庆医科大学动物实验中心,雄性,体质量20~25 g,动物许可证号:SCXK(渝)2012-0001,相对湿度(50±10)%,室温(24±2)℃,12 h明暗轮换条件下饲养。
1.3 试剂与仪器
胃动素(MOT)、生长抑素(SS)、P物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)试剂盒,北京普尔伟业生物科技有限公司;白细胞介素(IL)-6、IL-12、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)试剂盒,美国Biolegend公司;TRIzol总RNA抽提试剂,美国Invitrogen公司;诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶-2(COX-2)引物,上海生物工程公司;无水乙醇(分析纯)、甲醛(分析纯),重庆市品誉化工有限公司。
旋转蒸发仪(R-114,瑞士Buchi公司);离心机(VS-15CFN,韩国Vision科学株式会社);紫外分光光度计(UV-1750,日本岛津公司);数码相机(D550,日本佳能公司);PCR仪(T100,美国Bio-Red公司)。
1.4 散血草提取物制备
将干散血草粉碎后与蒸馏水按质量比1∶20混合,将混合物加热至沸腾,每次提取20 min,过滤得到提取液,重复3次,合并提取液,蒸干后得水提物备用。
1.5 造模、分组与给药
采用生理盐水配制利血平悬浊液。除正常组外,其余小鼠按10 mg/kg浓度腹腔注射0.2 mL利血平悬浊液,制作胃溃疡模型[6
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