实时荧光定量PCR技术.pptVIP

TaqMan法 应用范围 起始模板的定量 基因型分析 目的基因定量 产物鉴定 SNP分析 TaqMan法 优缺点 对目标序列的高特异性 ------阴性结果确定 设计相对简单 ------与目标序列某一区域互补 重复性比较好 优 点 只适合一个特定的目标 委托公司标记，价格较高 不易找到本底低的探针 缺 点 实时荧光定量PCR 方法 3------- Molecular beacon 法(分子信标) 标记荧光的发夹探针 环与目标序列互补 茎由互补配对序列组成 环 茎 荧光素 淬灭剂 发夹型杂交探针 Molecular beacon (分子信标) 工作原理 荧光共振能量转移（FRET） 探针与DNA杂交时产生荧光 -----变性过程：产生非特异性荧光 -----延伸过程：不产生荧光 ------退火过程：产生特异性荧光，检测荧光信号 Molecular beacon (分子信标) 应用范围 起始模板的定量 基因型分析 产物鉴定 SNP（单核苷酸多态性）分析 Molecular beaco