《生理科学实验作业范本》1C班-朱榕生-43.docVIP

实验报告 课程名称： 生理科学实验 实验类型： 动物实验 实验项目名称： 药物对抗电刺激引起小鼠惊厥的作用 同组学生姓名： 颜辉 乐辰升 指导老师： 唐法娣 实验43 药物对抗电刺激引起小鼠惊厥的作用 朱榕生 颜辉 乐辰升 （浙江大学医学院2011级临床医学专业1C班第1组，浙江，杭州，310058） zhurongsheng@zju.edu.cn [摘 要] 目的 制作小鼠惊厥模型、了解惊厥的发生机制、探索药物（苯巴比妥钠）对小鼠电惊厥的保护作用。 方法 利用电刺激筛选出能发生电惊厥的小鼠，用苦味酸标记，分成对照组和苯巴比妥钠组，分别腹腔注射生理盐水和苯巴比妥钠，15分钟后以先前记录的刺激强度分别再次给予刺激，记录发生惊厥的小鼠数量。结果 生理盐水组17只小鼠，12只发生惊厥，惊厥百分率为71%；苯巴比妥钠组17只小鼠，0只发生惊厥，惊厥百分率为0%；苯巴比妥钠组小鼠电惊厥率显著低于生理盐水组（P0.01）结论 苯巴比妥钠能有效对抗电刺激引起的小鼠惊厥。 [关键词] 小鼠；苯巴比妥；电惊厥 电惊厥法是利用电流刺激动物诱发惊厥，并利用这种实验模型来筛选抗癫痫大发作的药物。目前最常用的方法是最大电休克发作实验(maximal electroshock seizure test,MES)。一般认为，MES是癫痫大发作的实验模型，受试化合物若能明显对抗MES，则该化合物有可能发展成为在临床上治疗癫痫大发作有效的药物。 小鼠受到一定强度的电刺激会发生惊厥现象，特征为双后肢强直。巴比妥（barbital）类抑制中枢神经系统，随着剂量的由小到大，中枢抑制作用的程度由浅入深。当剂量大于催眠剂量时有抗惊厥作用。本实验借助小鼠的电惊厥表现，检验苯巴比妥钠的神经抑制对电惊厥的预防作用[1]。 材料与方法 实验动物 ICR小鼠4只，体重（23.50.58）g 实验试剂 0.5%苯巴比妥钠（sodium phenobarbital）溶液，生理盐水 实验器材 JTC-1型惊厥及痛觉实验交流电刺激器（上海软隆科技发展有限公司） 实验方法 参数设置 输出电压先调到15伏，刺激时间设为0.5秒，刺激周期设为单刺激。 动物筛选 将惊厥仪输出线的鳄鱼夹间断用生理盐水浸湿，一个夹在下颚部，一个夹在小鼠两耳根间的皮肤。从15伏开始加压，每次加2-3伏，直到出现后肢强直性伸直的惊厥现象（(小鼠的惊厥发生过程:僵直屈曲期→后肢伸直期→阵挛期→恢复期。以双后腿强直作为惊厥的指标)），记录下此电压值，选出小鼠。 分组处理 将出现电惊厥反应的小鼠分为两组，分别用苦味酸标记，称重。对照组小鼠按0.1mL/10g体重剂量腹腔注射生理盐水，苯巴比妥钠组小鼠按0.1mL/10g体重剂量腹腔注射苯巴比妥钠溶液。 实验观察 给药15min后，以筛选时记录的参数给小鼠以电刺激，观察小鼠惊厥的发生情况。 统计分析 数据用Excel 统计，结果用x±s表示，并用卡方检验进行显著性分析，P0.01 表示差异显著。 结果 电惊厥实验结果见表1 表1.电惊厥实验结果汇总表 生理盐水 苯巴比妥钠 分组 惊厥 未惊厥 惊厥 未惊厥 1 0 2 0 2 2 1 2 0 2 3 1 0 0 2 4 2 0 0 2 5 2 0 0 2 6 1 0 0 1 7 1 1 0 2 8 1 0 0 1 9 2 0 0 2 10 1 0 0 1 苯巴比妥钠对电刺激引起小鼠惊厥作用的影响见表2 表2.苯巴比妥钠对小鼠电惊厥作用的影响 分组 合计 生理盐水 苯巴比妥钠 效应 惊厥 12 0 12 未惊厥 5 17 22 合计 17 17 34 生理盐水组惊厥数为12只，未惊厥数为5只，惊厥百分率为71%；苯巴比妥钠组惊厥数为0只，未惊厥数为17只，惊厥百分率为0%。两者卡方检验P0.01，有显著差异。 讨论 电刺激引起小鼠惊厥发生的机制 电刺激可以形成小鼠头部的强电流，从而产生全身强直性惊厥，表现为前肢屈曲、后肢伸直[1]。 苯巴比妥钠抗电刺激引起小鼠惊厥作用的机制 从实验结果中可得出苯巴比妥钠能有效对抗电惊厥，其抗电刺激引起小鼠惊厥的机制可能为苯巴比妥既能提高病灶周围正常组织的兴奋阈值、限制异常放电扩散，又能降低病灶内细胞的兴奋性，从而抑制病灶的异常放电。可能是作用于突触后膜上的GABA受体，增加Cl-的电导，导致膜超极化，降低其兴奋性；也可能是作用于突触前膜，降低前膜对Ca2+的通透性，减少Ca2+依赖性神经递质的释