常用方法学简介课件.pptVIP

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  • 2017-02-20 发布于河南
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3、酶 酶细胞化学反应的基本原理是利用酶对其相应底物的水解、氧化等作用,使底物的反应产物被某种捕获剂捕获并在原位沉淀,形成有色的终产物,借此测定该酶在细胞内的分布及活性强弱。 4、核酸 显示DNA的传统方法是Feulgen反应(Feulgen reaction),组织切片或细胞涂片先经稀盐酸处理,使DNA水解,醛基暴露,再用雪夫试剂处理,形成紫红色反应产物。 (四)免疫组织化学术(immunohistochemistry) 利用免疫学抗原和抗体特异性结合的原理,检测组织或细胞中的多肽和蛋白质等大分子物质的分布。为显示抗原抗体复合物的存在,需进行抗体标记;用荧光素如异硫氰酸荧光素标记,可以在荧光显微镜下观察,用胶体金标记,可以在电镜下观察,用辣根过氧化酶标记,则可在光镜下或在电镜下观察。常用的方法有直接法、间接法和亲和素-生物素复合物法(ABC法)等。 荧光的观察(按标本分类) 在荧光显微镜下观察的标本,当然必须发出荧光,可是大多数标本本身不能发出荧光,因而必须用荧光色素处理过才能发出荧光。 (A)自发荧光 (B)二次荧光 (C)抗体荧光技术 (A)自发荧光(不加染色) 有些物质不加染色,也能发出荧光(自发荧光或原发荧光),但在医学和生物学(细胞学、生物组织、培养体等)领域中,只有很少物质具有自发荧光,常采用后

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