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酶化学B---课件.pptVIP

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Enzyme Mechanisms – Chymotrypsin 课后题 9.胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和弹性蛋白酶作为催化剂有哪些相似之处?有哪些不同之处?在酶的分子结构上是哪些因素引起这些差异? 答:相似之处:①执行相同的反应——裂解肽键;②其结构和作用机制很相似;③相对分子质量范围在 2.5×103 , 并且具有相似的顺序和三级结构;④ 3 个极性残基—— His57、Asp102 和 Ser195 在活性部位形成催化三联体。 不同之处:①专一性不同 (二)烯醇化酶(enolase) 作用需要金属离子(Mg2+) 《生物化学教程》 Enolase reaction involves metal ion and general acid-base catalysis general base catalysis: proton abstracted by Lys435 general acid catalysis: Glu211 donates proton, facilitates elimination of the -OH group Metal ion catalysis: two Mg2+ ions bind and orient the substrate and stabilize the enolic intermediate. This makes the C-2 proton (blue) more acidic (lowers its pKa) thus easier to remove Fig. 6-23, Lehninger 4th Ed. 它们的活性中心是由两个天冬氨酸残基所组成,如由胃膜分泌的胃蛋白酶、肾脏中的血管紧张素释放酶及细胞溶酶体中的某些组织蛋白酶等。 胃蛋白酶是典型的天门冬氨酰蛋白酶。一条肽链,相对分子质量为35×103;胃蛋白酶的活性中心含有一水分子,水分子的两翼是Asp 215和Asp32(当一个天冬氨酸为离子化形式,另一个为非离子化形式时酶才表 现其活性;天冬氨酸在酶的催化过程中起两个作用:激活它们之间的水分子,充当质子 的受体和质子的供体,形成催化二联体,进行广义的酸碱催化)。 (五)、天冬氨酸蛋白酶 天冬氨酸蛋白酶 天冬氨酸-活化水 天冬氨酸蛋白酶催化机制 天冬氨酸-活化水 思考题 1. 胃蛋白酶偏酸性,这说明其有哪些官能团?有哪些氨基酸提供这些官能团? 大连理工大学2012年生物化工专业生物化学 2. 苏州大学2004 年生物化学考研试题 1) 举例说明竞争性抑制原理及应用 2) 以溶菌酶或糜蛋白酶为例说明酶作用机理 思考题 3. 胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和弹性蛋白酶的三维结构相似,活性中心的丝氨酸附近的氨基酸序列也完全相同, 但作用的底物各不相同。 试根据底物的结构特点推测三种酶作用部位的结构特点。 厦门大学2004年 4. 胰凝乳蛋白酶的活性中心中构成一个电荷中继网的三个氨基酸残基是: ( ) A, HIS,Arg,Glu B ,Ser,Lys,Asp C, Ser,His,Asp D, Ser,Arg,Glu 江苏大学2005年 思考题 5. 利用DIFP对胰凝乳蛋白酶进行化学修饰,DIFP在温和条件下只与酶上的一个Serl95结合,化学修饰后,酶失去活性,且此酶也不能再与最适底物类似物TPCK结合,说明Serl95是( ): A. 别构部位 B. 催化部位 C. 底物结合部位 D. 与酶的催化活性无关。 天津工业大学2007年 6、酶催化反应的本质是降低达到反应平衡的活化能,请用实例说明共价催化、酸碱催化降低活化能的机理。 2008 年中国农业大学 思考题 8、判断:丝氨酸蛋白酶反应的动力学属于乒乓机制 中国海洋大学研究生考试真题2011生化 9.欲较彻底的水解丝心蛋白,选用( )为宜。A.弹性蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.胰凝乳蛋白酶 D.嗜热菌蛋白酶 南开大学 2002 年 10.判断:二异丙基磷酰氟是胰蛋白酶的亲和标记 南开大学 2001 年 四?、 酶活性的调节控制 调节酶:活性可被调节的酶,主要是 2. 酶在生物体内的调节主要有别构调节和( )?

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