实验三果蝇的单因子杂交实验.ppt-湖州师范学院精品课程.ppt

《遗 传 学》校 级 精 品 课 程 实验三 果蝇的单因子杂交实验 湖州师范学院 生命科学学院生物系 《遗 传 学》校 级 精 品 课 程 一、实验目的 1、通过实验深刻理解孟德尔分离定律 2、学习遗传学实验结果记录及统计处理方法 二、实验材料 野生型：长翅（+ / +） 突变型：残翅（vg / vg） 长翅果蝇：长翅座位是Ⅱ67.0，翅长超过尾部。长翅对残翅完全显性。 残翅果蝇：双翅几乎没有，只 有少量残痕，不能飞翔。 三、实验仪器设备 ※体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿。 ※ 乙醚、玉米粉、琼脂、红塘、酵母粉、丙酸等。 正 交 反 交 P： 长翅（♀）×残翅（♂） 残翅（♀）×长翅（♂） （+/+） （vg / vg） （vg / vg） （+/+） ↓ ↓ F1： 长翅 长翅 （+/ vg） （+/ vg） ↓ ↓ F2： 长翅 残翅 长翅 残翅 （+/+ +/vg）（vg / vg） （+/+ +/vg）（vg / vg） 1 ： 2 ： 1 1 ： 2 ： 1 单因子杂交是指一对等位基因间的杂交。 四、实验原理 ※一对杂合状态的等位基因，在遗传上保持相对的独立性，在配子形成时按原样分离到不同的配子中去，配子分离比为1：1，其自交后代中基因型分离比为1：2：1，表型分离比为3：1。 五、实验步骤 1.选处女蝇：将旧瓶中的果蝇麻醉处死，在8h内收集处女蝇，雌、雄分开培养，可提前2-3天收集。 2.杂交：一组做正交、一组做反交各1瓶，麻醉、选取果蝇，每瓶放5对，确保杂交瓶中每只果蝇完全苏醒，没有死蝇。贴好标签，于25℃恒温箱培养。 3.处死亲本：7d后，处死杂交亲本。 4.观察F1：再过4-5天，F1成蝇出现，连续观察2—3天，或集中观察记录F1表型。 4.F1互交：选取正交、反交各5对F1果蝇，分别转入一新培养瓶（不需处女蝇），贴好标签，于25℃培养。 5.处死亲本：7d后，杀死F1代亲本果蝇。 6.观察F2：再过5d，F2成蝇出现，开始观察记录F2 ，连续统计7-8d。 注意：（统计过的果蝇放入酒精瓶中，杀死） 五、实验步骤 六、实验结果 1、观察并统计正、反交F1代表型及个体数，比较正、反交结果，分析基因间的显、隐性关系。 2、观察并统计正、反交F2代表型及个体数，计算不同表型个体数的比例，比较正、反交实验结果。 3、根据你的结果，对该实验F2代的统计结果作X2测验，填入表格。 观察结果 统计日期 长翅（♀）×残翅（♂） 残翅（♀）×长翅（♂） 长翅数 残翅数 长翅数 残翅数 F1代： 观察结果 统计日期 长翅（♀）×残翅（♂） 残翅（♀）×长翅（♂） 长翅数 残翅数 长翅数 残翅数 合 计 F2代： 六、实验结果 对F2代的统计结果做x2测验： 野生型 （正、反交合并） 突变型 （正、反交合并） 总计 实际观察数（O） 预期数（E） 偏差（O-E） (O-E)2/E 自由度＝n－1＝ x2＝∑(O-E)2/E＝ 六、实验结果 查x2表，进行差异显著水平检验 P n 0.99 0.95 0.50 0.10 0.05 0.02 0.01 1 0.00016 0.0039 0.15 2.71 3.84 5.41 6.64 2 0.0201 0.103 1.39 4.61 5.99 7.82 9.21 3 0.115 0