高二生物微生物的生长极其控制选读.ppt

第六章微生物的生长及其控制 第一节 微生物生长的测定 第二节 微生物的生长规律 第三节 影响微生物生长的主要因素 第四节 微生物培养法概论 第五节 微生物生长的控制 第一节 微生物生长的测定 一、微生物的纯培养 二、微生物生长的测定 （一）微生物细胞数目的测定 （二）微生物生长量的测定 （三）丝状微生物菌丝长度的测定 一、微生物的纯培养 微生物在自然界中不仅分布很广，而且都是混杂地生活在一起。要想研究或利用某一微生物，必须把混杂的微生物类群分离开来，以得到只含一种微生物的培养。微生物学中将在实验室条件下从一个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代称为纯培养。纯培养的分离，是研究和利用微生物的第一步，是微生物工作中最重要的环节之一。最常用的方法有稀释平板法、划线法、单细胞挑取法及利用选择培养基分离法等。 稀释倒平板法（倾注法（混菌法）、涂布法） 这是最常用的纯种分离法，先将待分离的材料作一系列的稀释(如1：10、1：100、1：1000、1：10，000……)，然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至45℃的琼脂培养基相混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当，平皿上就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。 划线法 将已熔化的培养基倒入无菌平皿，冷却凝固后，用接种环沾取少许待分离的材料，在培养基表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物将随着划线次数的增加而分散，经保温培养形成菌落。划线开始的部分细菌分散度小，形成的菌落往往连在一起。由于连续划线，微生物逐渐减少，划到最后，常可形成单个孤立的菌落。这种单个菌落可能由一个细胞繁殖而来，故可获得纯培养。用其他工具如弯形玻璃代替接种环，在培养基表面涂布，亦可得到同样结果。此法较为简便。 单细胞挑取法 这种方法是从待分离的材料中挑取一个细胞来培养，从而获得纯培养。具体方法是将显微镜挑取器装置在显微镜上，把一滴菌悬液置于载玻片上，用安装在显微镜挑取器上的极细的毛细吸管，在显微镜下对准某一个单独的细胞挑取，再接种到培养基上培养。此法需要非常熟练的操作人员，多限于高度专业化的科学研究中采用。 利用选择培养基分离法 不同微生物需要不同的营养物质。有些微生物生长适于酸性环境，有些则适于碱性环境。各种微生物对不同的化学试剂如消毒剂(酚)、染料(结晶紫等)、抗生素及其他物质等具有不同的抵抗能力。利用这些特性，便可配制成适合于某种微生物生长而限制其他微生物生长的各种选择性培养基，以达到纯种分离的目的。另外，也可以将待分离的样品先进行适当处理，以消除不希望分离到的微生物。对一些生理类型比较特殊的微生物，为了提高分离机率，往往在涂布分离前先进行富集培养，其目的是提供一个特别设计的培养环境，以帮助所需的特殊生理类型的微生物的生长，而不利于其他类型微生物的生长。 微生物纯培养分离方法的比较稀释平板法 既可定性，又可定量，用途广泛 平板划线法 方法简便，多用于分离细菌 单细胞挑取法 局限于高度专业化的科学研究 利用选择培养基法 适用于分离某些生理类型 较特殊的微生物 二、微生物生长的测定 微生物特别是单细胞微生物，体积很小，个体的生长很难测定，而且也没有什么实际应用价值。因此，在微生物学的研究和应用中，通常是测定群体的增加量，即群体的生长。 测定不同种类、不同生长状态微生物的生长情况，需要选用不同的指标。通常对单细胞微生物来说，既可测定细胞数目，又可测定生长量；而对多细胞微生物(尤其是丝状真菌)，则常以菌丝生长的长度等作为生长指标。 （一）微生物细胞数目的测定 －－适用于单细胞微生物或丝状微生物的孢子 直接计数法－－总菌计数 1、计数板计数法（常用） 2、比例计数法 间接计数法－－活菌计数 1、平板菌落计数法 2、液体稀释法 3、厌氧菌菌落计数 其他计数法 1、比浊法 2、膜过滤法 （二）微生物生长量的测定 －－适用于一切微生物 直接法 1、测体积法 2、称重法 间接法 1、含氮量测定法 2、DNA含量测定法 3、其他生理指标法 （三）丝状微生物菌丝长度的测定 培养基表面菌体生长速率测定法 培养料中菌体速率测定法 单个菌丝顶端生长速率测定法 第二节 微生物的生长规律 一、微生物的个体生长和同步生长 二、单细胞微生物的典型生长曲线 三、