生物化学第8章酶通论36205幻灯片.pptVIP

第8章 酶通论 酶在生物体内的重要性 酶的化学本质 关于酶化学本质的分歧 对RNA型催化剂的命名 抗体酶 酯酶的底物、过渡态及过渡态类似物的结构 一、酶催化作用的特点 酶和一般催化剂的比较 催化过程与非催化过程自由能的变化 催化过程与非催化过程自由能的变化 酶的催化效率 酶作为生物催化剂的特点 二、酶的化学本质及其组成 酶的化学组成 辅因子 单体酶、寡聚酶、多酶复合体 三、酶的命名和分类 酶的命名和分类 国际系统分类法及酶的编号 氧化还原酶类（EC1） 转移酶类（EC2） 水解酶类（EC3） 裂合酶类（EC4） 异构酶类（EC5） 连接酶类（EC6） 四、酶的专一性 相对专一性 蛋白酶的专一性 各种蛋白酶的专一性 凝血酶的专一性 旋光异构专一性 几何异构专一性 特殊的立体化学专一性 甘油激酶催化反应产物的专一性 辅酶NAD还原加氢的立体异构专一性 “锁与钥匙” 假说 “锁与钥匙” 示意图 “诱导契合” 假说 “诱导契合” 示意图 五、酶的活力测定和分离纯化 酶活力 酶活力的指标 酶活力测定对反应时间的要求 酶活力测定对反应时间的要求 酶的活力单位 酶活力的国际单位 酶活力的实用单位 一种大的酶活力单位 酶的比活力 酶活力的测定方法 酶的分离和纯化 L-氨基酸氧化酶不能催化D-氨基酸氧化脱氨。 有些酶的底物没有异构体，但反应的产物可以是异构体，实际反应的产物只是两种异构体中的一种。 酶的立体化学专一性还表现在能区分从有机化学的观点来看属于对称分子中的两个相等的基团，只催化其中的一个反应，而不催化另一个反应。例如，一端由14C标记的甘油，在甘油激酶的催化下可以与ATP反应，仅产生一种标记产物，甘油-1-磷酸。酵母醇脱氢酶在催化反应时，辅酶尼克酰胺环C4上只有一侧可以加氢或脱氢。 甘油激酶 （lock and key） 该假说认为，酶的活性部位是刚性的，其形状刚好能与底物吻合，非底物因形状不吻合，所以不能与酶结合。 此假说不能解释酶能够催化逆反应，以及有些酶可以催化多种底物反应。 （induced-fit） 该假说认为酶的活性中心在与底物结合时会发生构象的变化，活性中心在底物的诱导下，采取了与底物形状吻合的构象。此假说现已得到公认。 专一性底物 非专一性底物 非专一性底物 酶的定量是以其催化能力的大小来衡量的，称为酶活力(或酶活性)。 在酶催化反应过程中，底物的量逐渐减少，产物的量逐渐增加，通过检测单位时间底物的减少量或产物的增加量，可以测出酶催化能力的大小，也就是酶活力的大小。 由于底物的初始量往往较大，在短时间内底物浓度变化的相对值很小，不容易准确测定。而产物是从无到有，在短时间内产物浓度变化的相对值很大，所以常以单位时间产物浓度的增加作为衡量酶活力的指标。 在试管反应中，随着酶反应的进行，产物浓度逐渐增加，底物浓度逐渐减少，逆反应逐渐增强；酶由于变性，活力也会逐渐下降；反应条件也会逐渐偏离最适条件。因此，随着时间的推移，反应速率会逐渐下降。若经过较长时间的酶反应再测定产物的增加量，单位时间的产物增加量就会减少；而只经过短时间的反应就测定产物的增加量，单位时间的产物增加量就较高。后者才能反应出酶活力的实际水平。 测定酶活力时，应测定其初速率。但反应的时间又不能太短，时间太短产物积累量太少，达不到检测灵敏度所要求的量。因此，一般要求在底物的转化率不超过5%的时间内测定反应的产物量，产物的积累量应能够较准确地测量出来。 酶的活力单位有多种定义，其共同的定义是：在一定条件下，单位时间内将一定量的底物转化成产物所需的酶量为一个单位。这样，对于一个酶制剂来说，就可以用每ml或每mg酶制剂含有多少单位的酶来表示其酶浓度或酶含量（U/ml or U/mg）。 国际单位（IU）的定义： 在最适反应条件（温度25℃）下，每分钟内催化1μmol底物转化为产物所需的酶量为一个活力单位，即1 IU = 1μmol/min。 在实际工作中，人们还是习惯用一些与国际单位不同的单位来表示酶活力。实际上，有些酶活力无法用国际单位来表示。如α-淀粉酶的活力单位为每小时催化1g可溶性淀粉液化所需要的酶量，也有用每小时催化1ml 2%的可溶性淀粉液化所需要的酶量为1个单位的。 1972年，为了方便工业上使用，国际酶学委员会又推荐了一个大的酶活力单位，即Katal，规定为：在最适条件下，每秒钟催化1mol底物转化为产物所需的酶量为1Katal。 1Kat = 60×10 6 IU * (General Survey of Enzyme) 一、酶催化作用的特点 二、酶的化学本质及其组成 三、酶的命名和分类 四、