酸性染料比色法.ppt

含量测定 酸性染料比色法 酸性染料比色法 生物碱类药物与一些酸性染料如磺酸酞类指示剂，在一定pH条件下，可定量结合成有色离子对，根据朗伯-比尔定律测定生物碱的含量。适用于含量较低的生物碱制剂的测定。 1.原理和方法 在一定的pH介质中，生物碱类药物（B）可与氢离子结合成阳离子（BH+），一些酸性染料（HIn）在此条件下可解离成阴离子（In－），同时，上述阳离子与阴离子定量地结合成电中性的离子对化合物，可以定量地用有机溶剂提取，在一定波长处测定该溶液有色离子对的吸收度，即可计算出生物碱的含量，其反应式为： 也可将显色的有机溶剂层分离后，碱化（如加入醇制氢氧化钾），使其定量释放出与有机碱结合的酸性染料，测定其吸收度，计算生物碱的含量。 2.影响定量分析的因素 水相的pH和酸性染料的选择以及有机溶剂的影响，是酸性染料比色法成功的关键。 （1）水相pH值的选择 如果pH过低，抑制了酸性染料解离，使In—浓度太低，从而影响离子对的形成； 如果pH过高，生物碱呈游离状态，也不能形成离子对。 故选择一个最佳pH值使生物碱和染料全部以BH＋和In—形式存在，是酸性染料比色法至关重要的实验条件。 （2）酸性染料的选择 对所选用的酸性染料要求是： 不但能与生物碱定量地结合，而且生成的离子对在有机相中溶解度大，在最大吸收波长处有较高的吸收度，染料自身不被或很少被有机相提取。 （3）有机溶剂的影响 有机溶剂与离子对形成氢键的能力强，则提取效率高，如氯仿和二氯甲烷等，具有中等程度的提取率，并且提取的选择性也较好，为最常用的有机溶剂。 某些生物碱不能直接用酸或碱滴定，但与某些试剂反应后，能置换产生定量的酸或碱，可用酸或碱滴定液，从而间接计算被测药物的含量。 如氨茶碱原料中茶碱的含量测定就用此法。 置换酸碱滴定法 紫外分光光度法 含不饱和键、共轭体系或含有芳香环，在紫外光区有特征吸收的药物都可采用此法。