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- 2017-03-02 发布于河南
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第九章 分子生物学技术检测微生物 主要内容 第一节 核酸探针技术检测食品微生物(第六章p108) 第二节 PCR技术检测食品微生物(第七章p121) 第三节 环介导等温扩增技术检测食品微生物(第八章p161) 第四节 基因芯片技术检测食品微生物(第九章p172) 第一节 核酸探针技术检测食品微生物 一、探针的定义 定义:探针(probe),是指与特定的靶分子发生特异性相互作用,并可被特殊的方法探知的分子。 类型:抗体-抗原、生物素-抗生物素蛋白、生长因子-受体核酸探针:是指带有标记物的已知序列的核酸片段,它能和与其互补的核酸序列杂交,形成双链,所以可用于待测核酸样品中特定基因序列的检测。 二、核酸探针的工作原理 两条碱基互补的DNA链在适当条件下按碱基配对原则形成杂交DNA分子。根据DNA遗传序列的相对稳定性和互补原则,用已知特异的碱基序列作成有标记的一小段单链(或核苷酸序列)与被检测材料进行分子杂交。如果被检测材料中病原的遗传序列与探针具有互补的碱基序列,就会形成杂交双链,从而证明它们之间具有一定程度的同源性。(p108) 三、核酸探针的种类 (一)按来源及性质划分 1.基因组DNA探针 2.cDNA探针 3.RNA探针 4.寡核苷酸探针 (二)按标记物划分 1.放射性标记探针:用放射性同位素做为标记物 2.非放射性标记探针:生物素(Biotin)和地高辛(
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