氨茶碱溶出检测课件1.pptVIP

家兔体内氨茶碱的血药浓度和药物动力学参数的测定 组员：王红娟 姚磊 曹杰 白阳 李妮 刘小川 指导老师： 车力龙 陈素仙 仪器与药品 1.仪器 紫外分光光度仪，离心机，移液管，移液枪，试管，注射器 2.药品 0.1mol/L HCl, 0.1mol/L NaOH, 75%乙醇，氨茶碱，氯仿：异丙醇抽提液（95：5），生理盐水 实验步骤 1.标准曲线的绘制 取5支试管，依次加入茶碱标准液20、40、60、80、100ul，各加入0.1mol/L NaOH 4ml，终浓度依次为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ug/ml，测定各试管溶液A274和A298，计算ΔA，绘制标准曲线并求出直线回归方程。 2.血药浓度测定和药动学参数的计算 （1）取2.0—3.0kg健康家兔四只，用生理盐水灌胃25ml/kg。 实验结果 讨 论 1.本实验验证了氨茶碱在体内的代谢符合二房室模型，其药动学公式为C=27.55e-3.07t+31.18e-0.08t。 2. 计算其动力学参数时关键在于确定消除相的采血时间点。 * * 目的：学习氨茶碱的血药浓度的紫外测定方法，验证氨茶碱体内药动学模型为二房室模型，掌握药物动力学模型的判断方法和二房室模型相关参数的计算方法. 原理：氨茶碱在体液中可分离出茶碱，在酸性条件下，可用有机溶剂从血清中提出茶碱，并同时沉淀血清蛋白，再用碱液将茶碱从有机溶剂中提出，在波长274nm和波长298nm处测定碱性抽提液的吸光度（A），A298为本底（溶剂、血清）的吸光度，A274为茶碱和本底的吸光度。茶碱吸光度为ΔA=A274-A298。可根据标准曲线进行浓度换算，再用残差平方和法判断药动学模型，用残差法计算二房室模型相关参数。 （2）每只家兔一耳缘静脉注射氨茶碱15mg/kg，12min内注射完，另一耳缘静脉近根处取血，于给药后5、10、20、30min及1、2、3h采血，制备血清。 （3）取血清0.3ml，加0.1mol/L HCl 0.12ml，抽提液3.0ml，2500r/min离心10min，吸取氯仿液（下层）2.4ml，加0.1mol/L NaOH 2.4ml，2500r/min离心10min，吸取碱液（上层），以0.1mol/L NaOH作参比，测定吸光度，计算ΔA。 （4）利用标准曲线直线回归方程求出家兔体内氨茶碱的血药浓度，并判断其动力学模型和计算二房室模型相关参数。 1.标准曲线和直线回归方程 标准曲线制备时所求得的ΔA见表1,根据此表绘制曲线（图1），并求出直线回归方程。 表1 试管号 1 2 3 4 5 标准浓度C（μg/ml） 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 ΔA 0.005 0.027 0.050 0.062 0.077 ΔA 图1 直线回归方程: ΔA=-0.0092+0.0356C 2 . 四只家兔体内氨茶碱的血药浓度见表2，药—时曲线见图2 注：1. #为采血时间。 2. *为氨茶碱在兔子体内的血药浓度，单位μ g/ml。 3. X为四只兔子体内血药浓度的平均值，S为标准差 。 Time(h)# 0.083 0.167 0.333 0.5 1 2 3 Rabbit 1 52.30* 49.72* 42.75* 41.63* 38.26* 37.70* 35.73* Rabbit 2 64.66* 49.78* 48.09* 46.40* 43.60* 39.94* 36.29* Rabbit 3 54.83* 52.02* 49.22* 44.72* 42.75* 37.98* 34.61* Rabbit 4 54.55* 51.46* 47.81* 47.25* 41.63* 38.26* 35.45* X±S 56.59±5.50 50.75±1.17 46.97±2.88 45.00±4.30 41.56±4.06 38.47±1.00 35.52±0.70 表2 图 2 3. 药动学模型及参数计算 用残差平方和法判断四只家兔体内氨茶碱代谢模型为二房室模型，用残差法计算模型相关参数。数据见表3。 ? A B α β T1/2α(h) T1/2β(h) Rabbit 1 18.92 39.90 4.65 0.035 0.149 19.80 Rabbit 2 44.67 18.20 1.029 0.092 0.67 7.53 Rabbit 3