鑫诺美迪ARMSPCR产品原理与应用.PDFVIP

鑫诺美迪ARMS PCR产品原理与应用 ——肿瘤细胞突变相关基因 ? 技术部 ? 北京鑫诺美迪基因检测技术有限公 ? Beijing SinoMDgene Technology CO.,LTD. 鑫诺美迪产品原理与应用 ? 目录 ? 一、检测方法及原理 ? 二、流程与具体操作 ? 三、结果分析及解读 ? 四、背景及应用 一、检测方法及原理 基本原理： PCR扩增时在加入一对引物的 同时加入一个特异性的荧光探 针，该探针为一寡核苷酸，两 端分别标记一个报告荧光基团 和一个淬灭荧光基团。探针完 整时，报告基团发射的荧光信 号被淬灭基团吸收。但由于 Taq酶的5’端－3’ 外切酶 活性将探针酶切降解，使报告 荧光基团和淬灭荧光基团分离， 从而荧光监测系统可接收到荧 光信号。 每扩增一条DNA链，就有一个 荧光分子形成，实现了荧光信 号的累积与PCR产物形成完全 同步 一、检测方法及原理 检测方法：ARMS PCR法 扩增受阻突变系统 (Amplification Refractory Mutation System,ARMS) 基本原理： 附加错配突变设计在3′端引物序列中，若出现错配则不会出现扩增，如此引 物仅仅识别突变序列，而不识别正常序列。仪器通过检测反应孔中的荧光信号， 而达到检测相关已知突变基因型的目的。 二、流程与具体操作 具体流程： 配制PCR反应体系 核酸提取 加样 上机进行PCR反应 检测荧光信号 得出结果