维生素D检测方法的研究进展.docVIP

维生素D检测方法的研究进展 　　摘要：应用高效液相色谱法、液质联用法、放射免疫法、酶联免疫法、化学发光免疫法、电化学发光免疫法、全自动生化法等检测血清25-（OH）D浓度，可根据测定结果对人体维生素D的营养状况做出评价，因此，在方法选择时，应根据测定灵敏度、特异性、测定费用、测定时间及实验人员能力和实验室条件等实际情况进行综合考虑。为此，笔者对有关研究进展进行综述。 　　关键词：维生素D；钙代谢；25.羟基维生素D；全自动生化 　　中图分类号：R446.112 文献标志码：A 文章编号：1008―2409（2016）04―0171―06 　　维生素D是人体必需的营养素，其营养状况影响着人体钙和磷的正常代谢，与人体健康密切相关，因此，准确测量维生素D水平对于多种钙代谢相关疾病的预防和治疗有重要意义。维生素D在血液中主要以25-羟基维生素D[25-（OH）D]的形式运输，是评价体内维生素D营养状况最为有效的指标。高效液相色谱法、液质联用法、放射免疫法、酶联免疫法、化学发光免疫法、电化学发光免疫法、全自动生化法等方法均可检测血清25-（OH）D浓度，并根据测定结果对人体维生素D的营养状况做出评价。笔者就常用的血清25-（OH）D浓度的检测方法和各自特点作一综述。 　　1维生素D概述 　　维生素D是人体必需的营养素，在自然状态下，日光照射或植物性食物是维生素D的重要来源。维生素D是类固醇衍生物，其家族最重要的成员是维生素D2和维生素D3。维生素D2多含于植物性食物中，它是由植物的麦角固醇经阳光照射而合成的，维生素D3可由人体皮肤和脂肪组织在7-脱氢胆固醇经过阳光照射合成，这两种形式的维生素D均无生物活性，必须在体内经过两次羟化后方能发挥生物效应。维生素D属脂溶性维生素，来自食物中的维生素D2与脂肪一起经小肠吸收，在胆汁协助下形成乳糜微粒，由淋巴管进入血液，与阳光照射合成的维生素D，一起转运入肝脏。维生素D在肝脏中经干细胞微粒体中的25-羟化酶作用下，转化为25-羟基维生素D_[25-（OH）D]，再经过肾脏中线粒体1α羟化酶系统的作用下转变为有生物活性的1，25-羟基维生素D[1，25-（OH）2D]。维生素D、25-（OH）D、1，25-（OH）：D在人体内的半衰期分别为24 h、2周和4h。维生素D在血液中主要以25-（OH）D的形式运输，其浓度最高，最稳定，而且半衰期最长，能反映食物摄入和日光照射合成的维生素D总量，因此，血清25-（OH）D浓度是评价体内维生素D营养状况最为有效的指标。通常将维生素D缺乏定义为血清25-（OH）D水平低于20ng/ml，不足为20～30ng/ml，充足为30ng/ml以上。 　　维持正常的维生素D水平对调节钙磷代谢至关重要。具有生物活性的1，25-（OH）2D可以促进肠道钙结合蛋白的合成，通过下述3个方面使血清钙、磷含量增高；首先，促进肠道内钙、磷的吸收和运转，增加在体内的留存；其次，提高肾小管对钙、磷离子的再吸收，使尿钙、磷排出减少；最后，当低血钙膳食中缺钙时，在甲状旁腺素（PTH）的作用下促进钙、磷的吸收，动员骨中钙、磷释出。在维生素D缺乏的情况下，食物中的钙只有10%―15%能够被吸收，磷只有60%能够被吸收。1，25-（OH）2d通过与维生素受体结合，可提高肠道对钙磷的吸收效率，使钙吸收增加至30%～40%，磷增加至80%左右。众所周知，维生素D具有传统意义上的骨骼效应，近年来研究显示，维生素D不仅能够调节钙磷平衡和骨骼代谢，还具有调节免疫、抗肿瘤、调控细胞增殖、防治代谢综合征、抗炎、保护心血管健康等多种生物学功能。 　　然而，维生素D缺乏或不足的状况在全球范围内普遍存在，按照国际上对维生素D状态评价的普遍标准，全球已有50%的人口存在维生素D缺乏的风险。维生素D缺乏可能导致儿童佝偻病、新生儿低血钙、甲状腺功能减退、中老年人骨质疏松、骨软化症等多种钙代谢异常疾病，而且可使患高血压、冠心病的危险性增加。但长期或大剂量过多使用维生素D也会发生中毒，过量维生素D可导致高钙血症及多种衰老相关疾病，因此，有必要探索建立可靠、高效的测定方法，为维生素D的检测、相关疾病的诊断和预防提供有力的科学依据。 　　2维生素D的检测方法 　　现有多种方法用于测定血清25-（OH）D浓度来评价机体维生素D的营养状况，根据方法原理不同，可分为色谱分析法和免疫分析法。色谱分析法包括高效液相色谱法（HPLC）和液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS），可分离并检测不同的分析物，能区分并分别定量25-（OH）D2和25-（OH）D5。免疫分析法包括放射免疫法（RIA）、酶联免疫吸附法（ELISA）、化学发光免疫测定法（CLIA）、电化学发光免疫测定法（ECLIA）、全自动生化分析法等，由于所有