老年乙肝及HBV相关肝硬化患者外周血Th17细胞水平与IL―17、α―SMA及肝功能的相关性研究.docVIP

老年乙肝及HBV相关肝硬化患者外周血Th17细胞水平与IL―17、α―SMA及肝功能的相关性研究 　　[摘要] 目的 分析老年乙肝（CHB）和乙肝病毒（HBV）相关肝硬化患者外周血辅助性T细胞17（Th17）临床意义，探讨Th17对相关疾病的诊断价值。 方法 将我院收治的老年HBV感染者按病变类型分为CHB组及HBV相关性肝硬化组，另选80例老年健康体检者纳入正常组。比较各组Th17频率、白细胞介素-17（IL-17）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达与分布，探讨Th17、IL-17、α-SMA表达的相关性。 结果 HBV相关肝硬化组Th17频率、IL-17、IL-17 mRNA及α-SMA水平显著高于CHB组，CHB组上述指标显著高于正常组（P0.05）。结论 老年肝病患者Th17频率与肝脏炎症程度变化密切关联，检测Th17频率有助于早期明确疾病严重程度，预测病情转归。 　　[关键词] 乙型肝炎病毒；慢性乙型肝炎；肝硬化；辅助性T细胞17；α-平滑肌肌动蛋白 　　[中图分类号] R512.62 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2016）26-0037-03 　　乙型肝炎病毒（HBV）感染导致的慢性乙型肝炎（CHB）是我国常见病、高发病[1]。研究表明，辅助性T细胞17（Th17）可产生大量白细胞介素-17（IL-17），并参与肝脏疾病的发生、发展环节[2]。已有学者证实，Th17细胞频率改变、Th17/调节性T细胞（Treg）比例失衡与多种免疫性疾病的发病密切关联[3]。作为以免疫病理为主要发病机制的疾病，CHB和HBV相关性肝硬化亦可能与Th17细胞频率改变存在一定相关性。老年人群因其肝功能的自然衰减，其肝病转归对其生命健康有着至关重要的影响。基于为老年乙肝及乙肝相关疾病的临床诊治提供高效诊断依据的目的，本文选取我院收治的174例老年HBV感染者及同期80名老年健康体检者，进行了对照研究，现报道如下。 　　1资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选择我院2013年10月～2015年10月收治的174例老年HBV感染者，按照其病变类型分为CHB组（n=77）及HBV相关性肝硬化组（n=97），另选同期80健康体检者纳入正常组。CHB组男41例，女36例；年龄65～83岁，平均（69.26±12.37）岁；HBV相关肝硬化组男52例，女45例；年龄67～86岁，平均（68.83±9.26）岁；正常组男42例，女38例；年龄65～85岁，平均（66.94±10.31）岁。各组年龄、性别等比较差异无统计学意义（P0.05），具有可比性。本临床研究经我院医学伦理委员会批准，受试者均知情同意且自愿参与。 　　1.2 纳入排除标准 　　HBV感染者纳入标准：①年龄≥65岁；②参照《慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）》[4]确诊CHB或HBV相关性肝硬化；③6个月内无抗病毒或免疫调节治疗史；④未合并其他肝炎病毒感染。健康体检者纳入标准：①年龄≥65岁；②无肝炎病史；③HBV血清学标志物检测阴性。排除标准：①年龄65岁；②合并心、肝、肾等其他重要脏器严重病变；③合并HIV感染、恶性肿瘤患者。 　　1.3方法 　　（1）Th17细胞频率：受试者空腹采静脉血3 mL，使用Calibur流式细胞仪（美国BD公司）检测CD4+、IFNγ-、IL17+、IL22-，即为Th17细胞频率[5]。（2）IL-17：取离心血浆以酶免法检测IL-17水平；取肝组织以实时荧光定量PCR检测IL-17 mRNA。（3）α-SMA：取肝组织石蜡包埋标本，以SP法依次切片―脱蜡―水化―修复―一抗、二抗温育―显色―复染―脱水―透明―封片，以PBS代替一抗为空白对照，胞浆呈棕黄色即可判定为阳性细胞[6]，由Image 6.0软件计算平均光密度（AOD）。（4）其他指标：使用C8000生化分析仪（美国雅培公司）检测谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）等指标，使用ABI7300型荧光定量PCR仪（美国ABI公司）检测HBV血清学标志物及HBV DNA载量。 　　1.4 统计学方法 　　采用SPSS18.0统计学软件进行统计学分析，计数资料以[n（%）]表示，行χ2检验；计量资料以（x±s）表示，行t检验；采用Pearson法或Spearman法分析Th17细胞频率与ALT、TBIL等其他指标的相关性；P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 各组Th17细胞频率、IL-17表达水平、α-SMA表达水平比较 　　HBV相关性肝硬化组Th17细胞频率显著高于CHB组，CHB组Th17细胞频率显著高于正常组（P0.05）。以正常组肝组织IL-17 mRNA相对表达量为1.00，HBV相关性肝